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【目的】
1.通过观察L-精氨酸诱导昆明小鼠慢性胰腺炎(CP)模型的病理变化，分析雌雄小鼠成模的差异性，揭示L-精氨酸诱导不同性别CP模型差异的机制。
2.分析黄芩苷对CP胰腺炎症反应及胰腺纤维化程度的影响，阐明黄芩苷遏制CP病程进展的作用机制。
【方法】
分两部分：(1)健康昆明小鼠64只，雌雄各半，随机分为2组：雌性组(Female-CP)、雄性组(Male-CP)，各组又分为0、2、4、6周四个时间点(各时间点n=8)。除空白对照组(0时间点)外，其余小鼠通过腹腔注射20%L-精氨酸(3g/kg)建立CP模型，于造模后相应时间点分别麻醉处死动物。(2)健康雄性昆明小鼠72只，随机分为3组：空白对照组、CP模型组、黄芩苷治疗组，各组又分为2、4、6周三个时间点(各时间点n=8)。除空白对照组外，其余小鼠通过腹腔注射20%L-精氨酸(3g/kg)建立CP模型，造模2周后开始给予腹腔注射黄芩苷(100mg/kg)治疗。于造模后2周、4周、6周及治疗后对应时间点分别麻醉处死动物。
完整摘取小鼠胰腺组织，HE染色、Masson染色观察小鼠胰腺组织形态学改变及纤维化程度；免疫组化法检测胰腺组织纤维连接蛋白FN的表达；Westernblot检测胰腺组织iNOS及FN的蛋白表达；real-timePCR检测胰腺组织iNOS及MMP-1的mRNA表达。
【结果】
1L-精氨酸诱发的CP雌、雄小鼠胰腺组织病理学改变及纤维化程度
HE及Masson染色结果显示，雌性小鼠在造模后2周CP模型组胰腺组织出现间质水肿，少量巨噬细胞浸润及腺泡萎缩和坏死；而雄性CP模型组小鼠除有明显的胰腺组织萎缩、坏死外，还可见大量的巨噬细胞浸润，并有少量胶原纤维的沉积。随着造模时间的延长，雄性CP模型组在造模4周、6周时胰腺损伤程度进一步加重，胰腺小叶结构破坏严重，腺泡进一步萎缩、坏死，出现大量的管状化结构，甚至空泡样结构，胰腺组织大面积消失，被胶原纤维所取代；而雌性CP模型组在造模4周、6周时胰腺组织损伤程度明显轻于雄性CP模型组，可见少量胰腺腺泡细胞萎缩、坏死及巨噬细胞的浸润，胰腺纤维化程度也相对较轻。
2雌、雄小鼠CP模型的性别差异可能与iNOS和MMP-1有关
检测结果显示，CP模型组在造模后2周胰腺组织iNOS的蛋白和mRNA表达水平开始下降，在4周、6周时进一步降低，并且雄性模型组小鼠胰腺组织的iNOS表达水平降低较同一时间点雌性小鼠更为显著(P＜0.01)。MMP-1的mRNA表达水平发现，在造模后2周雌雄小鼠胰腺组织MMP-1mRNA表达水平均较空白组降低(P＜0.05)，并维持在较低水平，6周进一步降低，且雄性小鼠胰腺组织MMP-1mRNA表达水平较雌性小鼠下降的更为显著(P＜0.01)。
3黄芩苷抑制CP小鼠胰腺组织炎症反应及胰腺纤维化的可能机制
HE及Masson染色结果显示，黄芩苷干预组胰腺组织损伤程度明显轻于CP模型组，表现为胰腺间质水肿基本消失，仅见少量腺泡萎缩及炎性细胞浸润，胶原纤维的沉积也明显减轻。通过检测胰腺组织纤维化指标FN的表达变化，发现CP模型组胰腺纤维化程度明显，FN的蛋白表达明显升高，而黄芩苷治疗组胰腺纤维化程度明显减轻，FN的蛋白表达则明显减少(P＜0.01)。Westernbolt检测胰腺组织iNOS的表达变化，发现CP模型组iNOS的蛋白表达水平逐渐降低，而予以黄芩苷干预后，iNOS的蛋白表达明显高于CP模型组(P＜0.01)。进一步检测胰腺组织MMP-1的mRNA表达水平发现，与空白对照组相比，CP模型组胰腺组织MMP-1mRNA表达水平逐渐降低，且维持在较低水平，而黄芩苷治疗组各时间点的MMP-1较CP模型组表达显著升高(P＜0.01)。
【结论】
1.L-精氨酸诱导的CP模型在昆明雌雄小鼠中存在显著的病变程度差异，而这种性别差异可能与iNOS和MMP-1密切相关。
2.黄芩苷能够抑制胰腺炎症反应及胰腺纤维化程度，其作用机制可能是黄芩苷通过保护iNOS、促进MMP-1的表达进而发挥抗胰腺纤维化的作用。
1.通过观察L-精氨酸诱导昆明小鼠慢性胰腺炎(CP)模型的病理变化，分析雌雄小鼠成模的差异性，揭示L-精氨酸诱导不同性别CP模型差异的机制。
2.分析黄芩苷对CP胰腺炎症反应及胰腺纤维化程度的影响，阐明黄芩苷遏制CP病程进展的作用机制。
【方法】
分两部分：(1)健康昆明小鼠64只，雌雄各半，随机分为2组：雌性组(Female-CP)、雄性组(Male-CP)，各组又分为0、2、4、6周四个时间点(各时间点n=8)。除空白对照组(0时间点)外，其余小鼠通过腹腔注射20%L-精氨酸(3g/kg)建立CP模型，于造模后相应时间点分别麻醉处死动物。(2)健康雄性昆明小鼠72只，随机分为3组：空白对照组、CP模型组、黄芩苷治疗组，各组又分为2、4、6周三个时间点(各时间点n=8)。除空白对照组外，其余小鼠通过腹腔注射20%L-精氨酸(3g/kg)建立CP模型，造模2周后开始给予腹腔注射黄芩苷(100mg/kg)治疗。于造模后2周、4周、6周及治疗后对应时间点分别麻醉处死动物。
完整摘取小鼠胰腺组织，HE染色、Masson染色观察小鼠胰腺组织形态学改变及纤维化程度；免疫组化法检测胰腺组织纤维连接蛋白FN的表达；Westernblot检测胰腺组织iNOS及FN的蛋白表达；real-timePCR检测胰腺组织iNOS及MMP-1的mRNA表达。
【结果】
1L-精氨酸诱发的CP雌、雄小鼠胰腺组织病理学改变及纤维化程度
HE及Masson染色结果显示，雌性小鼠在造模后2周CP模型组胰腺组织出现间质水肿，少量巨噬细胞浸润及腺泡萎缩和坏死；而雄性CP模型组小鼠除有明显的胰腺组织萎缩、坏死外，还可见大量的巨噬细胞浸润，并有少量胶原纤维的沉积。随着造模时间的延长，雄性CP模型组在造模4周、6周时胰腺损伤程度进一步加重，胰腺小叶结构破坏严重，腺泡进一步萎缩、坏死，出现大量的管状化结构，甚至空泡样结构，胰腺组织大面积消失，被胶原纤维所取代；而雌性CP模型组在造模4周、6周时胰腺组织损伤程度明显轻于雄性CP模型组，可见少量胰腺腺泡细胞萎缩、坏死及巨噬细胞的浸润，胰腺纤维化程度也相对较轻。
2雌、雄小鼠CP模型的性别差异可能与iNOS和MMP-1有关
检测结果显示，CP模型组在造模后2周胰腺组织iNOS的蛋白和mRNA表达水平开始下降，在4周、6周时进一步降低，并且雄性模型组小鼠胰腺组织的iNOS表达水平降低较同一时间点雌性小鼠更为显著(P＜0.01)。MMP-1的mRNA表达水平发现，在造模后2周雌雄小鼠胰腺组织MMP-1mRNA表达水平均较空白组降低(P＜0.05)，并维持在较低水平，6周进一步降低，且雄性小鼠胰腺组织MMP-1mRNA表达水平较雌性小鼠下降的更为显著(P＜0.01)。
3黄芩苷抑制CP小鼠胰腺组织炎症反应及胰腺纤维化的可能机制
HE及Masson染色结果显示，黄芩苷干预组胰腺组织损伤程度明显轻于CP模型组，表现为胰腺间质水肿基本消失，仅见少量腺泡萎缩及炎性细胞浸润，胶原纤维的沉积也明显减轻。通过检测胰腺组织纤维化指标FN的表达变化，发现CP模型组胰腺纤维化程度明显，FN的蛋白表达明显升高，而黄芩苷治疗组胰腺纤维化程度明显减轻，FN的蛋白表达则明显减少(P＜0.01)。Westernbolt检测胰腺组织iNOS的表达变化，发现CP模型组iNOS的蛋白表达水平逐渐降低，而予以黄芩苷干预后，iNOS的蛋白表达明显高于CP模型组(P＜0.01)。进一步检测胰腺组织MMP-1的mRNA表达水平发现，与空白对照组相比，CP模型组胰腺组织MMP-1mRNA表达水平逐渐降低，且维持在较低水平，而黄芩苷治疗组各时间点的MMP-1较CP模型组表达显著升高(P＜0.01)。
【结论】
1.L-精氨酸诱导的CP模型在昆明雌雄小鼠中存在显著的病变程度差异，而这种性别差异可能与iNOS和MMP-1密切相关。
2.黄芩苷能够抑制胰腺炎症反应及胰腺纤维化程度，其作用机制可能是黄芩苷通过保护iNOS、促进MMP-1的表达进而发挥抗胰腺纤维化的作用。