青枯病菌的PCR检测及辣椒对青枯病菌的抗性研究

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青枯病是一种毁灭性土传病害,是世界上危害最大、分布最广、造成损失最严重的植物病害之一,至今尚无有效的化学农药和其他防治办法。本实验参照国内外文献,设计了能扩增青枯病菌的特异性引物AU759/AU760,结果表明:该对引物不但可以从辣椒上分离到的青枯病菌,也可以从番茄、茄子、马铃薯、罗汉果、烟草等多种作物上分离的青枯病菌扩增到大小为281 bp的特异性片段。该方法为鉴定作物青枯病菌株提供了一种快速特异的检测手段;进一步克隆了该片段后测序,在Genebank上比对发现该片段是合成UDP-3-0-(R-羟基十四酰)-N-乙酰氨基葡糖脱乙酰酶基因上的部分序列,该酶由lpxC基因编码,催化青枯病菌中类脂A生物合成的第2步,为青枯病菌生存所必需。利用本研究建立的PCR检测方法对从全国各地采集的标本初步鉴定后分离获得了41个青枯病菌菌株,从中选择20个有代表性的菌株,以感病番茄品种L390为鉴别寄主进行了致病性比较分析,获得了8个有强致病性的青枯病菌菌株。在此基础上选择有强致病性的菌株RS-4对从亚洲蔬菜中心辣椒种质库中选择的13个代表性的辣椒品种进行了抗病性筛选,获得了6个对青枯病菌有高度抗性的辣椒品种。
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