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目的高通量测序筛选汉防己甲素(Tetrandrine,Tet)对胃癌细胞作用后异常表达的mi RNAs,选择胃癌细胞中低表达mi R-1248、高表达mi R-193b-3p,探讨其对胃癌细胞(SGC-7901、HGC-27)生长抑制和促凋亡作用。方法采用WST-1方法检测Tet作用后,对胃癌细胞增殖情况的影响,流式细胞仪检测胃癌细胞周期和凋亡的变化情况。利用高通量测序技术,对Tet处理前后的胃癌细胞mi RNA和m RNA进行相关的测序分析。并用Real-time RT-PCR验证在胃癌细胞中mi R-1248、mi R-193b-3p的表达情况。在胃癌细胞中分别瞬时转染mi R-1248 inhibitor、mi R-193b-3p mimic,利用WST-1实验检测对胃癌细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测对胃癌细胞凋亡的影响,通过细胞划痕和Transwell小室实验检测对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响作用。结果一、不同浓度的Tet可以对胃癌细胞(SGC-7901、HGC-27)的增殖产生抑制作用,且呈现出浓度依赖性增长趋势(*P<0.05、**P<0.01)。当浓度10.00μmol/L时,胃癌SGC-7901细胞抑制率68.32%,当浓度2.50μmol/L,胃癌HGC-27细胞,时,抑制率为60.75%。二、流式细胞仪检测胃癌细胞周期结果:Tet处理48 h后,与对照组相比,胃癌SGC-7901、HGC-27细胞的周期均阻滞在S期,S期比例分别增加了9.05%(**P<0.01)、16.73%(**P<0.01)。三、流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡结果:与对照组相比,胃癌SGC-7901细胞的凋亡率增加了5.37%(**P<0.01),胃癌HGC-27细胞的凋亡率增加了11.05%(**P<0.01)。提示Tet可以促使胃癌细胞发生凋亡。四、高通量测序结果显示:与对照组相比,Tet作用后的胃癌细胞的mi RNA表达出现明显差异,其中有139个表达明显降低,93个表达明显升高。根据mi RNA和m RNA的关联分析,共确定了81个相关的mi RNA-m RNA对。Real-time RT-PCR验证结果显示:Tet处理后的mi R-1248的表达量比值为(Tet组/对照组)9.9×10-3倍,而mi R-193b-3p的表达量比值为(Tet组/对照组)103倍。五、利用WST-1实验检测,转染72小时mi R-1248 inhibitor后,与inhibitor NC相比,胃癌细胞SGC-7901、HGC-27的细胞活性数量明显降低,分别降低了40.15%、20.81%;而转染mi R-193b-3p mimic后,与mimic NC相比,胃癌SGC-7901、HGC-27的细胞数量分别降低了33.03%、22.92%。六、凋亡实验结果证明:分别转染mi R-1248 inhibitor和mi R-193b-3p mimic72小时后,对胃癌SGC-7901、HGC-27细胞均产生了诱导凋亡的作用。与对照组相比,转染mi R-1248 inhibitor的凋亡率分别为18.03%(**P<0.01)、13.13%(*P<0.05);转染mi R-193b-3p mimic的凋亡率分别为36.1%(**P<0.01)、36.1%(**P<0.01)。七、细胞划痕实验中,mi R-1248 inhibitor和mi R-193b-3p mimic分别转染24h、48h后,对胃癌SGC-7901、HGC-27细胞迁移均具有抑制作用。转染mi R-1248inhibitor后,分别在划痕24h、48h,胃癌SGC-7901细胞的细胞愈合率分别降低了2.93%、23.28%,与inhibitor NC组相比,具有统计学意义(*P<0.05、*P<0.05));胃癌HGC-27细胞的细胞愈合率分别降低了32.51%、28.48%,与inhibitor NC组相比,具有统计学意义(*P<0.05、*P<0.05)。而转染mi R-193b-3p mimic后,在划痕24h、48h,SGC-7901的细胞愈合率分别降低了18.88%、21.06%,与mimic NC组相比,具有统计学意义(*P<0.05、*P<0.05);HGC-27的细胞愈合率分别降低了25.44%、25.97%,与mimic NC组相比,具有统计学意义(*P<0.05、*P<0.05)。八、Transwell小室的细胞迁移实验结果显示:转染mi R-1248 inhibitor和mi R-193b-3p mimic后,与对照组相比,SGC-7901、HGC-27细胞平均穿膜细胞数明显降低。转染mi R-1248 inhibitor后,SGC-7901、HGC-27细胞分别减少了67.3%(**P<0.01)、83.0%(**P<0.01)。转染mi R-193b-3p mimic后,胃癌SGC-7901、HGC-27细胞分别减少了54.3%(*P<0.05)、70.4%(**P<0.01)。九、利用Transwell小室的细胞侵袭实验,转染mi R-1248 inhibitor和mi R-193b-3p mimic均对胃癌细胞的侵袭能力产生抑制作用。与inhibitor NC组相比,转染的mi R-1248 inhibitor后,胃癌SGC-7901、HGC-27细胞的侵袭抑制率分别为40.24%(**P<0.01)、69.92%(**P<0.01)。转染mi R-193b-3p mimic后胃癌SGC-7901、HGC-27细胞的侵袭抑制率分别为64.30%(**P<0.01)、60.84%(*P<0.05)。结论一、Tet可以抑制胃癌细胞的增殖,并促进其凋亡。二、mi R-1248 inhibitor、mi R-193b-3p mimic能够诱导胃癌细胞发生凋亡的现象,同时具有抑制胃癌细胞迁移和侵袭的能力。三、Tet可能是通过调节mi R-1248和mi R-193b-3p的表达,从而促进胃癌细胞的凋亡。