【摘 要】
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目的:研究C57BL6/J小鼠和成人BMSC分化为产热脂肪细胞的潜力,为体内产热脂肪细胞发生的来源提供更多可能。方法:1.通过检测基因表达量比较在不同条件和干预因素下诱导小鼠BMSC分化为产热脂肪细胞的能力:a.不同周龄的小鼠BMSC:6周、10-12周、16-20周龄;b.诱导过程中罗格列酮的影响;c.近、远端长骨BMSC;d.c AMP激动剂对BMSC来源的脂肪细胞的干预。2.小鼠和成人BMS
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目的:研究C57BL6/J小鼠和成人BMSC分化为产热脂肪细胞的潜力,为体内产热脂肪细胞发生的来源提供更多可能。方法:1.通过检测基因表达量比较在不同条件和干预因素下诱导小鼠BMSC分化为产热脂肪细胞的能力:a.不同周龄的小鼠BMSC:6周、10-12周、16-20周龄;b.诱导过程中罗格列酮的影响;c.近、远端长骨BMSC;d.c AMP激动剂对BMSC来源的脂肪细胞的干预。2.小鼠和成人BMSC成脂诱导时间梯度实验:检测诱导过程中不同时间点产热基因表达量。3.包装Prdm16过表达慢病毒,转染小鼠BMSC后成脂诱导,检测产热等相关基因表达量。4.冷刺激实验:将两组小鼠分别置于15℃和23℃环境一周后,提取BAT和腹股沟WAT做HE染色;提取BMSC成脂诱导后检测产热基因表达量。5.c AMP激动剂干预成人BMSC来源的脂肪细胞后,检测产热、成脂以及脂解相关基因表达量;检测细胞内和培养基中TG含量;镜下观察脂肪细胞形态和数量变化。6.将成人BMSC成脂诱导前,诱导后以及诱导后用c AMP激动剂干预的样本送公司做转录组测序并进行结果分析。结果:1.16-20周龄小鼠BMSC成脂分化效果更好,且罗格列酮的干预有助于提升产热关键基因Pgc1α的表达。2.近端BMSC成脂分化更好,且Pgc1α表达量更高,更有潜力向产热脂肪细胞分化。3.随着小鼠和成人BMSC成脂诱导时间延长,产热基因表达量逐渐提升。4.c AMP激动剂促进了小鼠和成人BMSC来源的脂肪细胞产热基因的表达,并且启动了脂解进程。5.Prdm16在小鼠和成人BMSC成脂诱导过程中表达没有明显改变;小鼠BMSC过表达Prdm16后成脂诱导,产热基因表达没有明显改变。6.RNA-seq结果显示成人BMSC成脂诱导以及用c AMP激动剂干预后都激活了产热进程和细胞迁移相关通路。结论:小鼠和成人BMSC都可以分化为产热脂肪细胞;小鼠近端BMSC分化为产热脂肪细胞的能力更强。
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