目的木瓜为一味常用中药,目前市场上被称作木瓜且入药的有四种,同为木瓜属植物的干燥近成熟果实。《中国药典》(2010版,一部)收载的唯一正品木瓜是“蔷薇科植物贴梗海棠的干燥近成熟果实”,俗称“皱皮木瓜”。主产于我国安徽、浙江、河南、湖北、四川和山东等地。其中以安徽宣城木瓜、湖北资丘木瓜和浙江淳安木瓜质量最好,四川木瓜产量最大。山东临沂与山东菏泽为山东木瓜主产区,种植面积较大,其中菏泽木瓜(又称曹州木瓜)为光皮木瓜,与药典收录皱皮木瓜不同,主要用于观赏。临沂木瓜以皱皮木瓜为主,目前也主要用于观赏和园林绿化等,其皱皮木瓜果实的药用开发未受到重视。对山东木瓜的研究大多是从植物学角度对山东木瓜栽培品种进行分类鉴别,缺少药用方面的研究。对山东木瓜药材质量缺乏较系统、较全面的现代科学的评价标准,限制了山东木瓜药材的推广与应用。为了能更好的利用山东皱皮木瓜药材资源,推进山东皱皮木瓜现代化发展,本课题运用色谱联用分析技术,结合药典的质量控制方法,并通过与两个道地产区药材质量的对比研究,客观、系统的评价了山东皱皮木瓜药材的质量,为山东皱皮木瓜药材的质量控制提供了科学的方法和研究数据。方法较系统地收集了山东产木瓜果实和药材,安徽和湖北产木瓜饮片以及化学对照品,并将收集的山东木瓜果实按照药典方法制备成木瓜药材。首先参照《中国药典》(2010版,一部)木瓜药材检查项目,对所收集的木瓜药材及饮片进行了水分、灰分、醇溶性浸出物及酸度检查,初步评价样品质量。采用高效液相色谱法,对多批木瓜药材及饮片中齐墩果酸与熊果酸的含量进行了分别测定及总含量测定。采用高效液相色谱法对山东木瓜药材及安徽和湖北木瓜饮片水溶性部分进行指纹图谱研究。借助化学模式识别技术,增强中药指纹图谱的质量控制体系。利用高效液相色谱一二极管阵列检测器(HPLC-DAD)、高效液相色谱一质谱(HPLC-MS)联用技术,综合HPLC色谱图、DAD紫外全波长扫描光谱图、总离子流色谱图、质谱信息等对木瓜水溶性部分指纹图谱中的指纹峰进行初步的定性研究。首次采用亲水作用色谱法(HILIC)对反相色谱法难于分离的木瓜水溶性部分中的强极性组分进行了指纹图谱分离分析。结果木瓜检查项目及齐墩果酸和熊果酸总含量测定结果显示,收集的35批木瓜药材及饮片均符合药典木瓜项下的规定,初步判断所收集木瓜药材及饮片质量合格,为我们下一步进行质量标准的研究提供了药材保证。含量测定结果表明,山东自采木瓜果实按药典加工的木瓜药材二者含量均高于购买的成品木瓜药材。2011年产的安徽与湖北木瓜饮片中二者含量均高于2010年产的,初步说明木瓜药材中二者含量会随着贮存年限增加而降低。确定了木瓜药材及饮片水溶性部分指纹图谱的色谱条件,初步建立了三个产区木瓜药材及饮片的指纹图谱并确定了共有峰。多种化学模式识别技术的运用保证了指纹图谱评价方法的综合性和客观性。相似度计算结果、主成分分析及聚类分析结果显示山东木瓜与安徽木瓜、湖北木瓜可归为一类,说明三个产地木瓜药材及饮片内在品质差别较小,可以相互替代。采用色谱联用技术,确定了木瓜水溶性部分指纹图谱中6个主成分色谱峰的可能的化学结构,分别为没食子酸类、原儿茶酸、花青素类、绿原酸类,增强了木瓜水溶部分指纹图谱的用于质量控制的特征性。亲水作用色谱法(HILIC)用于木瓜水溶性部分分离,初步确定了木瓜水溶性部分指纹图谱的色谱分析条件。结论及意义本课题选择具有现代药理活性的木瓜水溶性部分作为研究对象,综合采用现代色谱分析新技术,依据《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》的指导原则,建立了特征信息丰富的木瓜药材及饮片水溶性部分指纹图谱。借助多种模式识别技术,结合药效成分的含量测定,建立了木瓜药材综合质量控制方法,并用于山东木瓜药材的质量评价。本课题的研究进一步完善了木瓜药材的质量控制方法,为建立先进可行的质量控制标准提供了科学的实验依据,奠定了理论基础。对促进山东药用木瓜资源的开发利用和保证药材质量具有重要的意义和价值。