兽药残留是影响食品安全的一个重要因素，其中抗生素残留问题尤为突出。氯霉素(Chloramphenicol，CAP)是一种有效的广谱抗生素，常用于畜禽养殖中各种传染性疾病的治疗。但由于氯霉素存在严重的毒副作用，许多国家和地区均规定氯霉素最高残留限量为“不得检出”。恩诺沙星(Enrofloxacin，EF)是一种化学合成的广谱喹诺酮类抗菌药物，也是抗生素的一种。长期使用该药物会造成畜禽产品的药物残留，危害人体健康。仪器法是检测上述药物的常用方法，但由于耗时长、费用高，并不适用于现场快速检测。而免疫分析法具灵敏度高、准确度好等特点，在筛选检测中应用广泛。随着以上药物限量要求越趋严格，目前市面上的酶联免疫检测产品已越来越难满足检测要求，因此有必要开发更灵敏、更准确的快速检测产品。　　 本文以氯霉素及恩诺沙星为研究对象，建立酶联免疫检测试剂盒，并结合国内外常用方法来评价试剂盒的各个性能指标。主要研究结果如下：　　 (1)成功研制了氯霉素ELISA检测试剂盒。其灵敏度(检测低限，LLD)为0.04+0,01ng/mL，标准曲线线性范围(IC20～IC80)为0.10-4.17 ng/mL。氯霉素抗体对结构类似物和功能类似物无明显交叉反应。以蜂蜜、肌肉组织、牛奶、鸡蛋为检测样品，结果表明样品基质对检测无显著影响，各样品添加回收率均在80％～110％之间，检出限LOD为0.13～0.21 ng/g，测定限LOQ为0,31～0.46 ng/g，检测容量CCβ?在0.36～0.42 ng/g之间。分析内变异系数和分析间变异系数均<15％。试剂盒的各试剂具有良好的稳定性，包被抗体、酶标记抗原可在4℃保存1年。耐用性研究表明试剂盒重现性良好。采用HPLC法为参照方法与试剂盒进行比对，结果两方法的相关性系数R2=0.9941，两种方法对同个样品检测值的差异在所有差异平均值±2 SD范围内，表明两方法相关性和符合度均较为良好。　　 (2)优化恩诺沙星直接竞争ELISA法，组建恩诺沙星ELISA检测试剂盒，并对分析性能进行评价。其灵敏度LLD为0.07+0.08 ng/mL，标准曲线线性范围(IC20～IG80)为0.08～6.03 ng/mL。恩诺沙星抗体特异性好，对结构类似物及功能类似物无明显交叉反应。以鸡肉、鱼肉、虾肉、猪肉、牛奶、猪肝为检测样品，结果表明样品基质对检测无显著影响。各样品添加回收率均在80％～120％之间，检出限LOD为0.55～1.96ng/g，测定限LOQ为1.23-4.57 ng/g;确定限CCa在12.47～13.77 ng/g范围内，检测容量CCp在15.60～16.83 ng/g之间。分析内变异系数和分析间变异系数均<15％，符合试剂盒评判标准。包被抗原、酶标记抗体可在4℃保存1年，具有良好的稳定性。采用HPLC法与试剂盒进行相关性和符合度分析。结果两方法的相关性系数R2=0.9806，同个样品检测值的差异均在所有差异平均值±2 SD范围内，表明两种方法检测结果相符。　　 本文对研制的氯霉素ELISA检测试剂盒及恩诺沙星ELISA检测试剂盒进行了系统的评价，开发出快速检测试剂盒，满足渐趋严格的检测要求，弥补了市面上同类快速检试剂盒的不足。