[目 的]硫利达嗪曾用于精神分裂症等精神疾病的治疗,近年来许多研究发现它对肿瘤细胞的增殖具有一定的抑制作用。本课题通过探讨硫利达嗪抑制宫颈癌SiHa细胞增殖的作用机制,寻找硫利达嗪作用于SiHa细胞的可能靶点,有助于揭示硫利达嗪抗宫颈癌的分子机制,为应用硫利达嗪辅助宫颈癌的临床治疗提供参考依据。[方 法]通过PharmMapper工具预测与硫利达嗪相互作用的靶基因,然后使用STRING在线工具对靶基因进行通路和组织表达富集分析。选择宫颈癌SiHa细胞作为实验对象,按分组实验设计加药处理24h后通过CCK-8法检测硫利达嗪对SiHa细胞增殖的影响。将硫利达嗪的浓度设置为0（对照组）、5、10、15、20、25、30、35μmol/L,检测OD值,并计算抑制率,得出其IC50值。对硫利达嗪作用后的SiHa细胞通过流式细胞术检测其细胞周期变化与细胞凋亡变化。构建宫颈癌裸鼠皮下异种移植瘤模型,检测硫利达嗪的体内抗肿瘤活性。将硫利达嗪作用后的SiHa细胞株进行表达谱芯片实验,通过RMA（Robust Multichip Averaging）算法对数据进行背景校正与标准化,使用limma包以|log2（FoldChange）|≥1.0,FDR＜0.05 的标准筛选差异表达基因（Differentially Expressed Genes,DEGs）。使用 R 包 clusterProfiler 对得到的上调与下调 DEGs 分别进行GO和KEGG富集分析,同时对表达谱数据进行基因集富集分析（Gene Set Enrichment Analysis,GSEA）。将DEGs输入STRING数据库构建蛋白互作（Protein-ProteinInteraction,PPI）网络。采用 Cytoscape 插件 MCODE 对 PPI 网络进行模块分析,使用CytoHubba插件寻找关键靶蛋白。最后通过AutoDockTools软件将靶蛋白与硫利达嗪进行分子对接,评估结合能力。[结 果]通过PharmMapper共筛选到47个靶基因,富集到肿瘤相关通路和宫颈癌细胞。CCK-8实验结果表明,将SiHa细胞分别使用不同浓度的硫利达嗪作用24小时后,SiHa细胞增殖受到抑制,呈一定的剂量依赖关系,计算得到硫利达嗪对SiHa细胞的IC50值为23.01μmol/L。流式细胞凋亡实验发现硫利达嗪可诱导宫颈癌SiHa细胞的凋亡;细胞周期实验发现硫利达嗪可以通过阻滞细胞S期和G2/M期来抑制宫颈癌细胞增殖。裸鼠成瘤实验结果表明硫利达嗪能使裸鼠瘤体重量减轻。对芯片数据进行生物信息学分析,结果显示上调的DEGs有235个,下调的DEGs有119个。上调DEGs参与了内质网应激、营养水平、胞外刺激及饥饿反应应答等生物过程,涉及到的细胞组分包括血小板α颗粒、液泡膜、细胞器外膜等;富集的KEGG通路有内质网中蛋白质加工、癌症转录失调、脂质与粥样动脉硬化、胰岛素信号、自噬、铁死亡、细胞凋亡、mTOR信号通路等。下调DEGs参与了细胞器分裂、核分裂等生物过程,涉及的细胞组分有纺锤体、染色体着丝粒区域等,具有微管结合的分子功能;富集的KEGG通路有细胞周期、FoxO信号通路等。GSEA结果表明SiHa细胞加入硫利达嗪后,细胞周期、DNA复制与卵母细胞减数分裂等通路下调,类固醇生物合成、mTOR信号通路、胰岛素信号等通路上调。对DEGs构建PPI网络,包含341个节点和741条边。通过MCODE算法发现两个重要模块。模块1富集到细胞周期、p53信号等通路,模块2富集类固醇合成、萜类主链的生物合成等通路。进一步筛选得到BUB1B和CCNB1两个关键蛋白。分子对接结果表明硫利达嗪与这两个靶蛋白结合性较好。[结 论]硫利达嗪可能通过与CCNB1和BUB1B等细胞周期蛋白结合,抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖,同时可以促进宫颈癌细胞的凋亡。硫利达嗪具有作为宫颈癌临床辅助治疗药物的潜力。