【摘 要】
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精子冷冻保存是人工授精技术的必要手段之一,在生产进程中,精子冷冻保护剂的成分是至关重要的。蛋白质酪氨酸磷酸化是判断精子是否获能的指标之一。在精子获能过程中产生的ROS,当ROS积累一定水平时会产生氧化应激反应。为了防止氧化应激,减少对精子的冷冻损伤或阻止过早精子成熟,在冷冻保护剂中添加抗氧化剂补充剂可以提供对潜在ROS聚集有着增强保护的作用。研究发现,藏红花素(crocin)是一种有效的抗氧化剂,
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精子冷冻保存是人工授精技术的必要手段之一,在生产进程中,精子冷冻保护剂的成分是至关重要的。蛋白质酪氨酸磷酸化是判断精子是否获能的指标之一。在精子获能过程中产生的ROS,当ROS积累一定水平时会产生氧化应激反应。为了防止氧化应激,减少对精子的冷冻损伤或阻止过早精子成熟,在冷冻保护剂中添加抗氧化剂补充剂可以提供对潜在ROS聚集有着增强保护的作用。研究发现,藏红花素(crocin)是一种有效的抗氧化剂,具有降低脂质过氧化,线粒体和溶酶体膜损伤的能力,类似于保护剂。本试验的目的是研究藏红花素作为冷冻保护剂的成分对牛精子的获能及质量的影响以及相关抗氧化基因及凋亡基因表达量的影响。在精子冷冻保护剂中添加0、0.5、1、15、2mM的crocin,进行冷冻两周,在解冻后,进行检测精子CASA检查、低渗肿胀实验、考马斯染色试验来以及CASA辅助仪器测得的精子活力指标,浓度在0.5mM时精子形态质量及运动质量与对照组不明显差别,但在处理组中效果最好(P<0.05);评估冷冻-解冻后的精子获能后蛋白质酪氨酸磷酸化水平,其蛋白量为35kDa,crocin(0.5mM)是酪氨酸磷酸化水平最高的(P<0.05),但与对照组差异不明显;在相关抗氧化基因中,crocin(0.5mM)MAD、CAT和GPX的mRNA表达量最高,在相关凋亡基因中,crocin(0.5mM)Caspase-3,TNF-amRNA表达量最低(P<0.05),Caspase-8表达量与对照组差异不不显著但著低于其他处理组。综上所述,添加藏红花素能够提高精子的抗氧化性减少细胞凋,且对精子质量没有明显的损伤,同时有助于精子获能。
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