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恶性胶质瘤是成人脑部肿瘤中最常见的类型,约占颅脑肿瘤的40-50%,因为其浸润性而难以通过传统的手术切除,并以其极低的生存率为特征。而人类巨细胞病毒(HCMV)目前在胶质瘤中所发挥的作用引起了相当大的兴趣和争议。程序性死亡因子1(PD-1)的单克隆抗体在胶质瘤的治疗过程中取得了一定的进展,但治疗结果仍不尽如人意,其程序性死亡因子配体1(PD-L1,CD274),被认为和恶性胶质瘤的免疫逃逸机制有关,并与HCMV的感染具有相关性,而Toll样受体3(TLR3)在病原体感染的细胞或动物中可以诱导抗病毒的状态,通过对TLR3和胶质瘤中PD-L1表达变化关系的研究,我们希望探究新的联合免疫治疗方法,为临床治疗提供新的思路。目的:研究在HCMV感染的胶质瘤中,PD-L1的表达机制是否与TLR3相关。方法:使用免疫组织化学染色技术检测临床胶质瘤标本中IE2、PD-L1和TLR3的表达情况;HCMV感染胶质瘤细胞后,使用q-PCR技术和免疫荧光染色技术检测PD-L1 RNA和蛋白的表达情况;细胞转染技术封闭TLR3的表达;使用WB技术检测封闭TLR3表达的胶质瘤在感染HCMV后PD-L1的表达情况;使用ELISA技术检测封闭TLR3表达的胶质瘤感染HCMV后细胞因子TGF-β和IL-8的分泌情况。结果:我们在70%的Ⅲ级和85%的Ⅳ恶性胶质瘤标本中发现IE2阳性,与IE2阴性的标本相比较,PD-L1和TLR3的表达量均呈现增高,P<0.05;在HCMV感染胶质瘤后0、6和72h提取RNA,0、24和72h提取蛋白质,检测PD-L1的RNA和蛋白表达量升高20倍以上;转染siRNA后,TLR3的表达量通过WB检测下降70%以上,认为封闭成功;封闭TLR3后,感染HCMV后,PD-L1的表达量相较于未封闭组下降明显,具有统计学意义,P<0.05;封闭TLR3后,会诱导T细胞TGF-β的分泌,上升2倍以上,但抑制IL-8的分泌,几乎无法检测。结论:HCMV感染的胶质瘤细胞中PD-L1的表达量相较于未感染组更高,这可能是HCMV促进胶质瘤恶性程度升高的原因之一。而在封闭TLR3的表达后,在HCMV感染的肿瘤细胞中可以观察到PD-L1的表达下降,我们认为PD-L1的表达可以由胶质瘤细胞中的TLR3触发介导,因此,我们提出了使用组合PD-L1单克隆抗体与阻断TLR3触发来针对HCMV感染的胶质母细胞瘤的新型免疫治疗。