儿童急性淋巴细胞白血病及细胞系p73、DCC、nm23-H1、nm23-H2和E2A-PBX1基因异常表达的研究

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我们应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术、定量RT-PCR技术检测了63例急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞系和53例原发性儿童ALL患者的p73、DCC、nm23-H1、nm23-H2和E2A-PBX1融合基因mRNA表达改变情况,同时结合病人的临床病例资料进行了分析。应用DNA甲基化酶谱测定(REP)、双亚硫酸盐修饰的PCR(MSP)和PCR产物测序(BGS)等技术对63例急性淋巴细胞白血病细胞系p73基因第1外显子的甲基化进行了检测。63例ALL细胞系中,p73mRNA异常表达率33.3%(21/63);DCC mRNA阴性表达率46.0%(29/63);nm23-H1、-H2 mRNA表达明显高于正常血细胞;E2A-PBX1融合基因mRNA占11.0%(7/63),全部为前B-ALL,占前B-ALL 19.0%(7/37)。53例原发性儿童ALL中,p73 mRNA阴性表达率26.4%(14/53),DCC mRNA阴性表达率39.6%(21/53),nm23-H1、-H2的表达明显高于正常血细胞,4例(7.5%)检测到E2A-PBX1mRNA。p73 mRNA阴性表达与ALL无病生存期(DFS)、总生存期(OS)的降低有明显关系。E2A-PBX1融合基因mRNA也与患者预后有明显关系。63例ALL细胞系中,38.1%存在p73基因的高甲基化。正常淋巴细胞和不存在p73基因高甲基化的细胞系表达p73mRNA,大多数高甲基化的细胞系不表达p73 mRNA。研究结果表明,儿童ALL中p73mRNA存在较高的阴性表达,其主要机制为p73基因高甲基化,p73基因失活在ALL的发生发展中起重要作用,p73 mRNA检测对判断儿童ALL患者的预后有一定临床意义。儿童ALL中存在较高比例的DCC mRNA阴性表达和nm23-H1、-H2 mRNA的高表达,说明在ALL的发生发展中DCC基因失活和nm23-H1、-H2基因的过表达起有一定作用。DCC、nm23-H1、-H2 mRNA表达状况与预后无明显关系。E2A-PBX1融合基因虽然不是儿童ALL中的常发事件,但有一定的预后意义。p73、DCC、nm23-H1、-H2基因相互之间无明显相关性。
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