本试验以六个芥菜(Brassica juncea Czern.et Coss.)栽培品种为研究材料,采用高温高湿人工加速种子老化的方法,得到不同老化程度的芥菜种子,通过对其生理生化指标变化与种子活力关系的分析和干种子基因组DNA损伤的ISSR研究,拟找出反映芥菜种子活力的主要生理生化指标,并在分子水平上探索出表现芥菜种子不同老化程度的DNA特异性谱带,从而为芥菜种质资源保存和生产实践中种子活力的测定提供实际参考和理论依据。试验结果表明：1.芥菜种子经人工老化(40℃,100%湿度)后,发芽率和活力指数随老化时间的延长而下降。在供试的六个品种中,大头菜的抗老化能力最差,老化处理6天时已完全丧失活力；青菜和香芥菜的发芽率变化情况相似,老化前期下降缓慢,到8天时陡然下降；榨菜的发芽率下降规律也呈先慢后快的趋势,但转折的时间较早,发生在老化的第6天；青皮棒菜和儿菜的活力变化规律近似,从老化处理开始,种子活力就直线降低。从几个品种老化处理后活力的变化情况可得出,芥菜种子老化6～8天为活力从有到无的转折点。2.在芥菜种子老化过程中,种子的相对电导率、MDA含量与种子活力呈负相关,而可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、SOD活力和POD活力与种子活力呈正相关。其中①芥菜种子的相对电导率随种子老化时间的延长逐渐升高。②除青皮棒菜的MDA含量在上升过程中有一个细微的回落外,其余芥菜品种种子中MDA含量均随种子老化程度的加深而逐渐上升,且大头菜和儿菜的变化趋势完全一致,即前期缓慢升高,老化4天后突然增加。③在芥菜老化种子中,可溶性蛋白质的含量并不是呈稳定的下降趋势,而是在某个阶段有一个缓慢的回升过程,且不同品种可溶性蛋白含量的回升阶段各不相同,大头菜、榨菜、香芥菜的回升区域在老化4～6天,青菜和青皮棒菜的回升区域在2～4天,而儿菜无明显回升迹象。④SOD活力和POD活力变化的总趋势表现为老化的前4天活力降低显著,随后缓慢下降。不同品种SOD和POD活力的变化差异很大,大头菜、儿菜和青皮棒菜种子中POD和SOD的初始活力相对较高,但老化过程中活力降低迅速；而榨菜、青菜和香芥菜种子中的POD和SOD的初始活力虽然较低,但老化过程中降低缓慢。3.对所测的不同老化程度种子生理生化指标的主成分分析结果显示,第一主成分由发芽率、活力指数、相对电导率和MDA四个指标决定,它们与种子的老化程度紧密相关,可以作为研究种子老化程度的代表性因子；第二主成分主要由POD活力决定,它与SOD活力和可溶性糖含量有一定相关性；第三主成分由可溶性蛋白含量单一决定。4.对人工老化芥菜干种子DNA的提取方法进行比较分析,找到了老化芥菜干种子DNA提取的适宜方法——改良CTAB-Ⅰ法,它是在改良CTAB法基础上改进得出的。具体改进步骤为①抽提液用25：24：1的Tris饱和酚／氯仿／异戊醇代替了24：1的氯仿／异戊醇；②抽提次数由一次增加到三次；③提取出的DNA最后溶解时加入1μL的RNA水解酶。此方法在老化芥菜干种子中提取的DNA纯度高、破损小、完整性好。5.筛选出适合老化芥菜种子ISSR分子标记分析的6条引物,即U809、U810、U817、U859、U880、U891,并建立了六种芥菜种子老化处理后的ISSR特异性谱带。通过对谱带的分析发现DNA的损伤区域为高分子量(2000-750bp)和低分子量(250-100bp)两个区域。在这两个区域中随着种子老化程度的加深,表现为ISSR条带减少,亮度变浅,甚至条带完全消失。