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蛋白质磷酸化,是指蛋白质翻译后修饰中一种极其重要的现象,影响着许多重要的生命活动,如代谢调节,基因表达以及细胞分裂等等。由于蛋白质磷酸化具有高度的动态性和低化学计量性,因此在质谱分析前对磷酸肽进行富集具有重大意义。在本论文中首次合成了一种二元金属氧化物二氧化钛与二氧化锆包覆四氧化三铁的磁性微球Fe3O4@TiO2-ZrO2,并将其用于磷酸肽的选择性富集研究中。所合成材料的结构、成分等特性通过扫描电子显微镜、透射电子显微镜、能量散射X射线光谱仪、傅立叶红外光谱仪、粉末X射线多晶衍射技术、氮吸附技术以及振动样品磁强计进行了表征,表征结果显示,金属氧化物被成功的包覆在Fe304微球的表面,Fe3O4@TiO2-ZrO2磁性微球粒径约为230 nm的球形颗粒,其中功能性金属氧化物包覆层的厚度约30 nm,且拥有较好磁性。在磷酸肽富集实验中,以p-酪蛋白作为标准蛋白进行磷酸肽富集条件的优化,并通过离子阱质谱(IT MS)对结果进行检测。同时用β-酪蛋白和牛血清白蛋白模拟半复杂样品以及用牛奶作为实际样品,分别考察材料从半复杂样品以及实际样品中富集磷酸肽的能力。研究得出磷酸肽富集最佳条件为:上样溶液中乙腈(ACN)浓度为60%,用三氟乙酸(TFA)调节缓冲液的pH值为2,加入1mol/L的酒石酸作为非磷酸肽抑制剂。在最佳条件下,所制备材料从标准蛋白中富集磷酸肽的检测限达到10-10mol/L。同时对半复杂样品以及牛奶中的磷酸肽均能高效富集。Fe3O4@TiO2和Fe3O4@Zr02分别倾向于富集多磷酸肽和单磷酸肽,Fe3O4@TiO2从牛奶中捕获到3个单磷酸肽和4个多磷酸肽,Fe3O4@ZrO2富集到5个单磷酸肽和3个多磷酸肽,而所制备的Fe3O4@TiO2-ZrO2材料不但对单、多磷酸肽均有很好的富集效果,同时比Fe3O4@TiO2和Fe3O4@ZrO2能富集到更多的磷酸化肽段,能够从牛奶中捕获到6个单磷酸肽和5个多磷酸肽。