【摘 要】
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产肠毒素大肠杆菌（ETEC）可引起腹泻性疾病,严重会导致动物死亡。目前,抗生素是治疗ETEC引起腹泻的主要药物,但滥用抗生素会使药物在动物体内残留并导致耐药菌株出现,这些问题对人类的健康造成潜在的威胁。众多研究表明,枯草芽孢杆菌具有促进营养物质吸收、提高机体抗氧化能力和改善肠道形态结构等生理功能,已被广泛应用于畜牧业,但目前对家兔方面却未有足够的研究和关注。因此,本实验以仔兔为实验对象,通过灌服枯
【基金项目】
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十三五重大专项省级资助项目（GX18B023）； 黑龙江省应用技术研究与开发计划重大项目（GA18B203）；
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产肠毒素大肠杆菌（ETEC）可引起腹泻性疾病,严重会导致动物死亡。目前,抗生素是治疗ETEC引起腹泻的主要药物,但滥用抗生素会使药物在动物体内残留并导致耐药菌株出现,这些问题对人类的健康造成潜在的威胁。众多研究表明,枯草芽孢杆菌具有促进营养物质吸收、提高机体抗氧化能力和改善肠道形态结构等生理功能,已被广泛应用于畜牧业,但目前对家兔方面却未有足够的研究和关注。因此,本实验以仔兔为实验对象,通过灌服枯草芽孢杆菌,探究其对ETEC攻毒仔兔肠道功能的保护效果,旨在为枯草芽孢杆菌在兽医临床应用提供数据支持和参考依据。本试验选取20只1月龄新西兰大白兔,随机分成4组:对照组（D组,生理盐水）、模型组（M组,攻毒+生理盐水）、抗生素组（K组,攻毒+诺氟沙星）、益生菌组（Y组,攻毒+枯草芽孢杆菌菌液）,每个处理组重复5只,试验周期为15 d。M组、K组、Y组通过腹腔注射0.5 m L 1×10~9 CFU/m L ETEC活菌菌液构建仔兔大肠杆菌病模型。注射后第3 d,通过观察兔的腹泻情况验证兔大肠杆菌病模型是否成功。K组经口灌服1 g诺氟沙星,Y组经口灌服2 m L 1×10~8 CFU/m L枯草芽孢杆菌活菌菌液。D组和M组经口灌服2 m L生理盐水,各组均在同一时间段给药,给药频率为一天一次。攻毒后第15 d采集仔兔血液、回肠、结肠以及结肠粪便。在试验期间每天观察并记录仔兔的排便情况,按照腹泻评分标准表对其进行评分;使用血常规全自动检测仪检测仔兔外周血血常规指标,记录白细胞总数、淋巴细胞、红细胞压积等含量的变化情况;通过HE染色方法,显微镜镜下观察回肠的绒毛长度和隐窝深度的变化情况;通过试剂盒检测仔兔血清炎性指标IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α和抗氧化指标TAC、CAT、MDA含量的变化;通过高通量测序数据,分析肠道菌群结构的变化情况。最终评价枯草芽孢杆菌在临床腹泻治疗中应用的可行性。研究结果发现:（1）枯草芽孢杆菌可以显著降低ETEC攻毒仔兔的腹泻评分,改善腹泻情况。（2）枯草芽孢杆菌可以降低血清IL-1、IL-6、TNF-α的含量,减轻仔兔体内的炎症反应。（3）枯草芽孢杆菌具有升高仔兔血清TAC的趋势,还能显著降低血清MDA的含量,保护机体免受过氧化损伤。（4）枯草芽孢杆菌可以显著地升高回肠VH和V/C,降低回肠CD,改善肠道形态结构（5）枯草芽孢杆菌可以在一定程度上改善肠道的菌群结构,提升Lactobacillus（乳酸杆菌属）的丰度,降低Acinetobacter（不动杆菌属）与Shigella（志贺氏菌属）的丰度,起到保护肠道的作用。试验结果表明枯草芽孢杆菌可对ETEC攻毒仔兔产生较好的肠道保护效果,能够满足临床需求,可替代抗生素作为临床预防或治疗腹泻疾病使用,具有良好的临床应用前景。
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