广西市售部分水产品中颚口线虫寄生情况调查及虫种鉴定

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颚口线虫是一种食源性人兽共患寄生虫,第一中间宿主为剑水蚤,第二中间宿主主要为淡水鱼类,成虫寄生于猫、犬、猪等终宿主的胃壁,人多因食用生的或不熟的含有颚口线虫幼虫的鱼类或肉类而感染。目前我国已报道50多例病例,2008年7月,广西首次发现1例颚口线虫病例,此后的追踪调查又发现了2例病人,说明我区的感染并非罕见。本研究对广西多地市售部分水产品中颚口线虫的感染情况进行了调查,并对收集的幼虫进行了虫种鉴定,旨在为探索本病的发生提供依据、为该虫的进一步研究奠定基础。   本研究为了解颚口线虫在我区部分水产品中的寄生情况,调查了横县、武鸣、宾阳、金城江4地市售148尾淡水鱼,南宁、横县等14个市县市售428条黄鳝,南宁、柳州等11个市县市售711条泥鳅及武鸣市售12条蛇,感染率为10.9%,而淡水鱼、泥鳅和蛇为颚口线虫阴性。同时,通过调查颚口线虫在黄鳝的头部、肌肉和内脏的不同部位寄生的情况发现,肌肉中颚口线虫幼虫的检出率要高于内脏。   为了解所检获的颚口线虫幼虫所属虫种,本研究首先运用形态学特征,通过对颚口线虫幼虫光学显微镜和扫描电镜观察和测量,根据幼虫形态、发育程度及体征数据的分析,可初步认为收获的虫体属于颚口线虫属(Gnathostoma)中棘颚口线虫(G.spinigerum)第三期幼虫。I   其次,运用PCR方法扩增了广西8地收获的及1株泰国颚口线虫三期幼虫rDNA-ITS2和部分线粒体C01基因并给以测序,通过测序进行序列分析,发现它们的rDNA-ITS2序列均相同,为472bp,利用MEGA4.0软件MP法、NJ法和UPGMA法建立rDNA-ITS2基因50%多数一致树,发现广西收集株与GenBank上收录的2株G.spinigerum泰国株同属一个亚群,自展值为99%以上,且从序列比较结果来看,广西收集株与从黄鳝中分离的G.spinigerum泰国株rDNA-ITS2基因序列完全相同,为472bp。本实验扩增的部分C01基因,因在其序列5‘端和3‘端存在着低质量的碱基,不能做全长比较,去掉5‘端和3‘端的低质量的碱基,所扩增的9地颚口线虫株部分C01基因序列均相同,为383bp,将所获C01序列通过Blast搜索,与GenBank上收录的2株G.spinigerum(傣国株和日本株)C01部分基因序列相同的碱基部分同源性为100%。因此,可以从分子生物学上证明,广西收获的虫株为棘颚口线虫(G.spinigerum)第三期幼虫。
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