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低剂量体外冲击波（Low-dose Extracorporeal Shock Wave,LDESW）可增加细胞膜的通透性，进而使不容易通过细胞膜的物质更容易通过细胞膜进入细胞内。体外实验显示：体外冲击波可促进化疗药物进入细胞内，促进细胞凋亡。这提示：可用体外冲击波辅助化疗药物治疗骨肉瘤。因此，我们认为：体外冲击波可通过改变细胞膜的通透性，定向增加化疗药物进入细胞内的含量，从而达到降低化疗药物的剂量的同时提高骨肉瘤治疗效果的目的。本研究将为如何增加化疗药物对骨肉瘤的治疗效果，减少化疗药物的使用剂量，增进肿瘤靶向治疗效果，提供一种新的手段和理论依据。实验目的研究低剂量体外冲击波协同甲氨蝶呤治疗人骨肉瘤的机制；研究低剂量体外冲击波能否增加细胞膜的通透性，使不容易通过细胞膜的化疗药物-甲氨蝶呤进入细胞内，增加骨肉瘤的治疗效果。实验方法本研究通过体外培养骨肉瘤U2OS细胞，应用不同次数，电容0.3μF、工作电压7KV和14KV的LDESW分别作用U2OS细胞，应用台盼蓝染色法检测LDESW对细胞活性的影响，分别测定出7KV和14KV的LDESW对U2OS细胞死亡率没有显著性影响(死亡率P＜5%)并且能最大程度增加细胞膜通透性的临界次数。为了探明冲击波是否能增加骨肉瘤细胞膜的通透性，我们选择不能渗透过细胞膜的荧光物质钙黄绿素（calcein）和荧光黄（Lucifer Yellow，LY）溶解在细胞外液，待冲击波作用后观察并比较实验组和对照组细胞内荧光物质的量。最后，测定冲击波能否促进MTX进入细胞内，在实验组与对照组细胞悬液内加入等浓度的MTX，用冲击波冲击后用甲氨蝶呤试剂盒测定实验组与对照组细胞内MTX的浓度，并进行比较。实验结果本实验研究结果显示：电容0.3μF、工作电压7KV的冲击波作用U2OS细胞低于400次,电容0.3μF、工作电压14KV的冲击波作用U2OS细胞低于150次对细胞死亡率无显著性影响（死亡率P＜5%）；加有荧光物质的骨肉瘤细胞悬液用LDESW作用后在荧光显微镜下定性观察同时利用荧光/化学发光分析仪进行定量分析发现实验组比对照组内的荧光量明显增多；用甲氨蝶呤试剂盒测定经过LDESW作用后的骨肉瘤细胞内的MTX量比对照组显著增多。结论本研究证实对细胞死亡率无明显影响的LDESW能够使骨肉瘤U2OS细胞膜通透性一过性增大，使不容易通过细胞膜的MTX更多的进入细胞内，起到辅助化疗的作用。