【摘 要】
:
目的:探讨不同时段增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期相关基因cyclinE和P27kip1基因及蛋白的表达与成纤维细胞实际所处的细胞周期进行的相关性,为将基因干扰治疗用于增生性瘢痕的防治提供前期研究基础。方法:以手术切取后低温保存的32例增生性瘢痕组织为材料,根据临床诊断及瘢痕形成的时间分为四个阶段:3个月,六个月,一年及两年的增生性瘢痕,利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术,观察不同阶段增生性
论文部分内容阅读
目的:探讨不同时段增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期相关基因cyclinE和P27kip1基因及蛋白的表达与成纤维细胞实际所处的细胞周期进行的相关性,为将基因干扰治疗用于增生性瘢痕的防治提供前期研究基础。
方法:以手术切取后低温保存的32例增生性瘢痕组织为材料,根据临床诊断及瘢痕形成的时间分为四个阶段:3个月,六个月,一年及两年的增生性瘢痕,利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术,观察不同阶段增生性瘢痕中cyclinE和P27kip1的mRNA表达情况,用蛋白电泳(Western Blot)技术观察二者的蛋白表达水平,以及用流式细胞术检测各个阶段增生性瘢痕中成纤维细胞的细胞周期情况。
结果:(1)RT-PCR实验结果:随着HS的发展,成纤维细胞中cyclinE的表达强度呈由强至弱的变化。3个月组与6个月组比较差异有统计学意义(P<0.05);6个月组分别与1年组、2年组比较差异有统计学意义(P<0.05);1年组与2年组比较差异无统计学意义(p>0.05)。而P27kip1的表达在增生性瘢痕早期明显低于晚期,3个月组与6个月组比较差异有统计学意义(P<0.05);6个月组分别与1年组、2年组比较差异有统计学意义(P<0.05);1年组与2年组比较差异无统计学意义(p>0.05)。(2)Western blotting实验结果:3个月组、6个月组增生性瘢痕的FB中cyclinE蛋白表达量明显高于1年及2年组,有统计学意义(P<0.05);1年及2年组之间差异无统计学意义(P>0.05)。P27kip1在3个月组、6个月组增生性瘢痕中的蛋白表达量明显低于1年及2年组(P<0.05);1年及2年组之间差异无统计学意义(P>0.05)。(3)流式细胞仪检测结果:3个月组、6个月组增生性瘢痕的成纤维细胞多数处于S期;而1年及2年组的增生性瘢痕的成纤维细胞多处于G0/G1期。
结论:(1)cyclinE在增生性瘢痕的增生期,无论是mRNA水平还是蛋白水平的表达量均是显著增高,其中以3个月组的表达量最高,6个月组次之。(2)增生性瘢痕中P27kip1在3个月组、6个月组时mRNA水平及蛋白水平的表达量显著低于1年及2年组。(3)不同时段增生性瘢痕中的周期调控基因cyclinE、P27kip1 mRNA的表达与最终产物蛋白的表达趋势与成纤维细胞细胞周期的运行基本一致。(4)cyclinE和P27kip1在增生性瘢痕的发生发展中相互拮抗,cyclinE的过表达及低水平的P27kip1是导致成纤维细胞异常增殖分化的原因之一。因此,cyclinE和P27kip1是调控增生性瘢痕处于增生期的重要调控因子,在增生性瘢痕发生发展的早期阶段对这对调控基因进行干扰治疗,有可能会控制增生性瘢痕的发生和发展。
其他文献
目的:肺间质纤维化是一种病因未明,发病机制不清,缺乏治疗手段的致命性肺间质疾病,肺间质纤维化的病理特征是肺泡上皮细胞损伤,成纤维细胞灶的形成以及细胞外基质(ECM)的过度沉积,最终导致肺组织结构的异常重构。近年来的研究发现成纤维细胞灶主要由表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的肌成纤维细胞构成,是造成ECM异常沉积的主要细胞。同时研究证实转化生长因子-β1(TGF-β1)是关键的致纤维化细胞因子,
最低肺泡有效浓度(minimal alveolar concentration,MAC)是指在一个大气压下,挥发性麻醉药和纯氧同时吸入时,在肺泡内能达到使50%的病人或动物对伤害刺激不会引起体动反应的浓度。在临床麻醉中,由于肌松药和镇静药的复合应用,使得通过观察切皮时身体的交感反应测量吸入麻醉药MAC值显得非常重要。这就涉及MACBAR的概念。MACBAR(the minimal alveolar
前言:阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)是一种多见于老年人的神经系统变性疾病,表现为进行性记忆力减退和痴呆、认知障碍、运动障碍。其特征性病理学改变是神经纤维缠结(neuofibrillary tangle,NFT),大量记忆性神经元数目减少,以及老年斑(senile plaque,SP)的形成。β淀粉样蛋白(Aβ)是老年斑的主要成分,它的异常沉积是AD发病的重要危险因素。β
目的:探讨影响131I治疗Graves病疗效的多个因素。方法:对172例首次接受131I治疗的Graves病患者随访1年,根据疗效分为痊愈组、甲减组和未愈组,分析治疗前患者的年龄、性别、甲状腺质地、甲状腺重量、病程、治疗前是否接受过抗甲状腺药物(Antithyroid drugs,ATD)、甲状腺最高摄131I率、摄99m锝指数(包括甲/颈比、疏/甲比)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobuli
目的:通过观察急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者外周血白细胞分化抗原14阳性(cluster of differentiation-14,CD14)单核细胞Toll样受体4(Tbll like receptor 4,TLR4)表达的变化和血清炎性因子肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor,TNF-α)浓度变化及相关性,对TLR4介导的
目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在高血压血管重构中的作用及阿托伐他汀的干预研究。方法:采用两肾一夹方法建立肾性高血压大鼠模型,将24只大鼠随机分为对照组(8只),高血压组(8只),阿托伐他汀组(8只),术后4周末开始用阿托伐他汀(50mg·kg-1·d-1)连续灌胃8周。检测大鼠尾动脉收缩压(SBP),光镜下观察血管结构变化并计算胸主动脉中层壁厚与内径
目的:探讨131I-Tyr-Octreotide采用氯胺T(Ch-T)氧化还原法制备的反应条件及放化纯、稳定性,观察其在正常小鼠体内的生物分布和代谢情况,并观察非小细胞肺癌(NSCLC)荷瘤鼠肿瘤部位对其的放射性摄取,进而行标记物131I-Tyr-Octreotide对非小细胞肺癌的抑瘤效果研究。方法:生物合成酪氨酸-奥曲肽(Tyr-Octreotide),采用Ch-T法进行131I标记,制备合成
目的:通过检测美托洛尔干预后G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)在左室心肌肥大细胞中表达和定位的变化,阐明GRK2参与心肌肥大时细胞信号的传递、心肌纤维的合成与组装的调节,美托洛尔对肥大心肌细胞中GRK2的影响,探讨美托洛尔抑制心肌肥大的机制。方法:1、实验动物:6月龄WKY大鼠6只、6月龄SHHF大鼠18只购买于成都达硕科技有限公司。通过双盲设计,将6月龄SHHF大鼠随机等分为3组,1组6月龄SHH
CD4+CD25+T细胞由小鼠的胸腺产生,小鼠出生3天开始从胸腺转移到外周,构成CD4+T细胞的5-10%,在正常情况下发挥调节功能,防止小鼠发生器官特异性自身免疫性疾病,称为CD4+CD25+天然调节性T(Treg)细胞。出生3天切除胸腺可以导致小鼠的多器官自身免疫性疾病,同种异体胸腺移植或回输CD4+CD25+T细胞可以防治小鼠模型自身免疫性疾病。人类具有调节功能的CD4+T细胞集中在CD25
目的:出生体重与成年疾病密切相关,大量研究表明影响出生体重的因素主要包括:营养因素、胎盘的结构和功能、生长因子以及激素。本研究通过瘦素、胰岛素及IGF—2对滋养细胞中PKB和P70S6K蛋白表达的影响,以及这一信号通路中PI3K的特异性抑制剂LY294002和mTOR的特异性抑制剂雷帕霉素(rapamycin)对PKB和P70S6K蛋白表达的调节作用,探讨瘦素、胰岛素及IGF—2对出生体重的影响是