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橡胶草是适宜在较寒冷地区生长的多年生草本植物,其根部能产天然橡胶,是极好的橡胶树替代产胶作物,目前美国和欧盟计划将橡胶草作为本国天然橡胶生产的战略作物。橡胶草种质资源的分类与评价是育种和生产利用的基础。本研究在新疆10个不同地区收集了181份样品,分别使用表型性状观察法及特异性引物鉴定法判断采集的样品是否为橡胶草。利用RAPD-PCR扩增技术对鉴定为橡胶草的样品进行遗传多样性分析。在背光通风处晾干采集回来的橡胶草种子,用聚丙烯塑料离心管密封后保存于4℃冰箱中。以橡胶草叶片为外植体,对采集的63份橡胶草野生植株进行试管保存,建立橡胶草再生体系。主要研究结论如下:1.分析设计鉴定橡胶草的特异性引物通过查询NCBI(美国国立生物技术信息中心)中橡胶草的核苷酸序列库,挑选一个橡胶草特异DNA片段(GenBank登录号:HB850815.1),用Oligo7.51软件分析设计一对橡胶草特异性鉴定引物TKp2-2L和TKp2-2R,并通过测序及Southern技术验证该引物能有效的鉴定橡胶草。用该特异性引物对采集的所有样品进行PCR鉴定,79份样品出现700bp左右的特异条带,即采集样品中有79株为橡胶草。选取其中63份橡胶草进行RAPD多样性分析研究。2.橡胶草种质资源遗传多样性的RAPD分析采用RAPD扩增技术对62份采自新疆以及1份采自美国的橡胶草种质资源进行遗传多样性分析。建立了橡胶草RAPD反应的最佳体系(20μ1)为:1.75U Taq聚合酶,30ng基因组模板DNA,0.25mmol/L dNTP,0.5μmol/L引物,2.0mmol/L Mg2+。PCR程序为:97℃预变性5min;94℃变性30s,37℃退火30s,72℃延伸70s,循环45次;72℃延伸10min。RAPD多样性分析结果表明:13个随机引物共扩增出225条带,其中,多态性条带224条,多态性比率为99.6%,这表明63份橡胶草种质资源的遗传多态性高。根据扩增条带统计分析后,使用NTSYS软件聚类分析得到63份橡胶草种质资源的树状图。当相似系数为0.519时,63份橡胶草种质资源可分为3组,美国地区单独为一组,禾木与喀纳斯地区为一组,其它地区的材料为一组;当遗传相似系数为0.535时,将阿克苏地区单独划分出来为第4组。3.橡胶草种质资源保存以那拉提地区的橡胶草叶片及种子为实验材料,分别研究其外植体消毒、诱导愈伤组织、出芽、生根、出瓶移栽的最优条件。试验结果表明:橡胶草种子的最佳消毒处理为:75%酒精消毒30s+20%(v/v)次氯酸钠溶液浸泡消毒30min+4℃春化1d;橡胶草叶片的最佳消毒处理为:在晴天,充分日晒3天以上时采集完全展开的嫩叶进行外植体消毒,75%酒精消毒30s+20%(v/v)次氯酸钠溶液消毒5min;最佳诱导愈伤组织培养基为:MS+0.5mg.L-12,4-D或者MS+0.1mg.L-12,4-D+0.5mg.L-16-BA,诱导率达到100%;最佳出芽培养基为:MS+0.3mg.L-1NAA+0.5mg.L-16-BA;最佳生根培养基为:1/2MS+15g蔗糖+0.5mg.L-1NAA;最佳移栽基质为蛭石,移栽前期必须保持湿度和26℃左右气温。