大鼠急性肠系膜上静脉血栓形成后D-D、IFABP及Bax/BCL-2的表达及意义

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目的:研究急性肠系膜上静脉血栓形成(ASMVT)后大鼠受累小肠在不同时间点的病理形态学改变及其细胞凋亡相关蛋白Bax、BCL-2的表达情况,结合相应时间点大鼠血清肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)及D-二聚体(D-D)浓度变化情况,探索ASMVT后小肠病理改变及病情监测指标。方法:选取健康成年雄性大鼠72只,随机分为三组:对照组、假手术组、实验组。采取结扎法建立大鼠急性肠系膜上静脉血栓形成模型。各组大鼠分别于建模后30分钟、1小时、2小时、4小时4个时间点切取病变肠段HE染色后显微镜下观察病理形态学改变、检测细胞凋亡相关蛋白BCL-2和Bax的表达,同时测血清IFABP、D-D浓度。结果:(1)HE染色光镜下观察肠管形态学变化:对照组大鼠肠管壁全层细胞形态正常,结构清楚;假手术组部分大鼠可以观察到肠粘膜上皮细胞轻度水肿,无明显粘膜脱落。实验组大鼠于建模后30分钟即可见粘膜淤血,粘膜破坏、脱落并随时间延长明显加重甚至出现腺体破坏,粘膜层及粘膜下层出血,部分肌层坏死等表现。肠管系膜血管于建模后2小时开始可以在镜下可以观察到血栓形成,于建模后4小时多数系膜血管内可见血栓形成。(2)假手术组与对照组比较,在各个时间点假手术组大鼠检测肠BCL-2和Bax表达变化较对照组略有变化但差异无统计学意义;实验组与对照组和假手术组比较,在各个时间点实验组大鼠检测肠BCL-2和Bax表达均显著增加(P<0.05);Bax/BCL-2比值显著增大(P<0.05);(3)假手术组与对照组比较,在各个时间点假手术组大鼠血清IFABP浓度较对照组略有变化但差异无统计学意义;实验组与对照组和假手术组比较,实验组大鼠在各个时间点血清IFABP浓度均显著升高(P<0.05),且随时间延长显著增加。(4)假手术组与对照组比较,在各个时间点假手术组大鼠血清D-D浓度较对照组略有变化但差异无统计学意义;实验组与对照组和假手术组比较,在各个时间点实验组大鼠血清D-D浓度均显著升高(P<0.05),且随时间延长显著增加。结论:(1)采用结扎肠系膜上静脉主干的方法能较好的模拟大鼠ASMVT后肠道所发生的损害,可以用来研究其病理生理学改变。(2)对大鼠ASMVT后受累肠管进行大体观察并进一步行HE染色镜下观察,能更好的了解其肠损伤发生、发展的经过,了解其机制,有助于解释ASMVT的临床表现及病情演变的规律。(3) ASMVT发生后肠道相继出现淤血及缺血性改变,伴随细胞凋亡,检测细胞凋亡相关因子Bax和BCL-2的表达并计算其比值Bax/BCL-2能更清楚的显示细胞凋亡的发展趋势,揭示肠管损害发生的机制。(4)血清IFABP浓度在ASMVT早期即有显著变化,且IFABP为小肠特异性标记物,因此,有望成为早期诊断ASMVT的血清学敏感指标。(5)血清D-D浓度的变化可以反映大鼠体内血栓形成趋势,并能反映大鼠体内血栓严重程度,在ASMVT的诊断中有重要的参考价值。(6)检测ASMVT后受累肠管细胞凋亡蛋白Bax、BCL-2的表达,结合相应时间点血清IFABP、D-D浓度,对ASMVT的早期诊断和对受累肠管的病理改变程度的判断有一定的临床借鉴意义。
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