增生性创面瘢痕是皮肤受损后启动自我修复程序所导致的不正常愈合的产物。对于深度皮肤缺损而言,自发的组织再生和不受控的胶原沉积往往会导致创面瘢痕的形成。组织工程支架作为细胞外基质的模板,通过干预创面愈合的微环境,规范胶原的沉积等,从而可能从源头上抑制或减少创面瘢痕的形成。为此,本课题由以下四部分组成:正常皮肤由表皮层、真皮层和皮下组织组成。其中表皮层用于阻隔和保护真皮层。从丝素纤维中剥离后,获得直径为100～400nm的丝素纳米纤维（SNF）。经收集和风干后获得厚度均一可控的SNF膜,用作表皮层。浸泡于交联剂激活后的0.4 wt.%丝素蛋白（SF）溶液中,SNF膜的孔隙率下降,疏水性增加,接触角从79.41°±3.68°增加到92.14°±2.47°,以阻碍下层水分的流失;湿态下SNF膜的力学性能从0 MPa增强到13.26±0.80 MPa,助于保护下层组织免受物理磨损,与正常皮肤表皮层的结构特征和理化性能类似。通过冷冻干燥技术制备的丝素/透明质酸（SF-HA）多孔支架被用作真皮层,SF和HA分别模拟了皮肤组织细胞外基质的蛋白质和多糖组分。将SNF膜和SNF-HA支架通过再生SF膜粘结在一起,形成了SNF-SF-HA双层丝蛋白基功能支架。双层支架浸泡在PBS中超过1个月,仍能保持形态稳定,且两层之间结合紧密无分离。相对于SNF膜,SNF-SF-HA支架的孔隙较大,亲水性和溶胀率分别提高31.9%和626.8%,提示其可能在创面愈合前期吸收组织液,保持微环境的湿润。SNF-SF-HA双层支架从结构和组分上模拟了皮肤组织的天然形态和结构,其水蒸气透过率可满足组织工程皮肤发挥正常功能。体外,将人脐静脉内皮细胞分别接种于SNF膜,SNF-SF-HA支架,硅凝胶膜中。结果显示,SNF膜的细胞活力最强,支架次之,硅凝胶膜最弱。这表明SNF膜相比于硅凝胶膜,更利于细胞生长,粘附,增殖和迁移。支架的细胞活力弱于SNF膜,但仍能满足医用敷料对细胞相容性的要求,推测是由于二维材料和三维材料之间结构和接种密度的差异所致。以新西兰大白兔的兔耳造模瘢痕创面模型,动物实验设空白对照组、SNF膜组、和SNF-SF-HA支架组。在术后第4和第6周进行HE染色,Masson染色,天狼星染色和免疫组化检测包括荧光标记TGF-β1、COL-1、α-SMA等因子。结果表明,SNF-SF-HA支架的瘢痕隆起（较低）和形态明显优于其他组;支架组的炎症浸润较弱,成纤维细胞的增殖较少;胶原纤维的沉积较薄且III型胶原的含量和形态最为接近正常皮肤;TGF-β1、COL-1、α-SMA的表达水平也呈现不同程度的下调。综上,SNF-SF-HA双层丝蛋白基功能支架能有效抑制和减轻兔耳瘢痕增生,推测其在创面愈合和组织重建中发挥了模板和填充作用,通过阻碍创面的收缩,吸收组织液,营造创面重建的良好微环境,下调炎症浸润和成纤维细胞的增生,规范胶原纤维的沉积和胶原类型的转换,以及下调TGF-β1、COL-1和α-SMA的表达水平,从而达到了抑制瘢痕形成的目的。该丝蛋白基支架在增生性创面瘢痕防治中具有较大的应用前景。