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研究背景及目的: 研究表明，肿瘤在缺氧环境下能够促进缺氧诱导因子-1α（Hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1α）表达并上调其靶基因血管内皮生长因子（ Vascular endothelial growth factor, VEGF），诱导肿瘤血管新生以促使肿瘤组织适应乏氧环境。在常氧状态下，肿瘤组织也可以通过分泌转化生长因子-β1（Transforming growth factor-beta1, TGF-β1）激活 TGF-β/Smad信号通路，稳定肿瘤微环境中HIF-1α的表达。而本课题组前期实验发现肝癌细胞内缺失的转化生长因子II型β受体（Transforming growth factor beta II receptor, TGF-βRII）导致TGF-β/Smad信号通路的作用失活。由此，本研究组意在探究通过恢复肝癌细胞的TGF-βRII基因表达，是否能激活TGF-β/Smad信号通路从而稳定HIF-1α蛋白的表达，并参与HIF-1α调控VEGF的转录活性，促使肝癌细胞在脱离乏氧环境的刺激后仍可诱导血管新生，最终增强肝癌组织的侵袭与转移能力。本文通过体外实验，运用过表达TGF-βRII基因的MHCC-97H人肝癌细胞，分别置于常氧或乏氧状态培养并给予TGF-β1激活通路，寻找TGF-βRII对 HIF-1α及其靶基因VEGF发挥的作用，以判断该作用对原发性肝癌发生复发与转移的可能机制。 方法： 以人高转移肝癌细胞MHCC-97H为实验材料，应用二氯化钴（CoCl2）建立体外乏氧模型，构建慢病毒载体 Lenti-TGF-βRII-puromycin-eGFP转染MHCC-97H细胞，获得空白组（MHCC-97H）、阴性对照组（MHCC-97H-VC）、实验组（MHCC-97H-VT）三组进行对照，各组均给予TGF-β1因子刺激培养0、3、6、12、24、48h。采用Western Blot法检测HIF-1α的表达，RT-PCR及ELISA法检测VEGF的转录及表达变化。 结果： 常氧培养时，相比于空白及阴性对照组，实验组中 VEGF在蛋白及 mRNA的表达水平明显增高（P＜0.05），并与TGF-β1的刺激有显著时效相关性；同时实验组 HIF-1α的蛋白表达在6小时后明显高于其余两组（P＜0.05），然而 mRNA水平无显著差异（P＞0.05）。乏氧培养时，实验组VEGF的mRNA及蛋白表达水平较空白及对照组显著增高（P＜0.05），而各组中HIF-1α的mRNA及蛋白表达水平无明显差异（P＞0.05）。 结论： 上调TGF-βRII基因激活TGF-β/Smad信号通路能够稳定HIF-1α的表达，促进HIF-1α介导上调VEGF的转录活性。