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猪肉品质及其调控是动物营养研究领域的热点。肌纤维类型是构成不同品种间肉质差异的关键因素之一。本论文旨在通过饲养试验研究日粮中添加白藜芦醇(Resveratrol，RES)对生长肥育猪肉质性状指标、背最长肌肌纤维类型以及脂联素(AdipoQ)信号通路关键基因表达的影响，并在细胞水平上探讨RES通过AdipoQ信号通路调控猪骨骼肌肌纤维类型转化的机制，为开发RES作为一种通过调控肌纤维类型进而改善猪肉品质的饲料添加剂提供科学理论依据。主要研究结果如下:
1、日粮中添加RES对生长肥育猪生长性能、胴体性状和肉质指标的影响
本试验选用24头65kg左右的杜×长×大三元杂交猪作为试验动物，设四个处理组:对照组（饲喂基础日粮）、200mg/kg组(饲喂基础日粮+200mg/kg RES)、400mg/kg组（饲喂基础日粮+400mg/kg RES）、600mg/kg组（饲喂基础日粮+600mg/kg RES），每组6头猪，在猪体重到110kg时屠宰取样。结果表明:(1)与对照组相比，日粮中添加RES对生长肥育期杜长大猪的生长性能、胴体性状以及血液指标方面没有显著性影响。(2)在肉质方面，三个试验组的肉色评分均显著上升;400mg/kg和600mg/kg组的肌肉电导率以及剪切力指标均显著低于对照组和200mg/kg组;400mg/kg和600mg/kg组的肌内脂肪含量显著高于对照组和200mg/kg组。由此可见，日粮中添加适量的RES能够明显改善猪背最长肌的颜色，降低肌肉剪切力和电导率，提高肌内脂肪含量，这说明RES具有改善猪肉品质的作用。其中，400mg/kg和600mg/kg添加量能达到改善肉质的最佳效果。
2、日粮中添加RES对猪骨骼肌肌纤维类型转化调控作用的研究
本试验采用上述饲养试验猪的背最长肌组织样品进行检测，旨在探讨日粮中添加RES对肥育猪背最长肌肌纤维类型、能量代谢酶活的影响，以及RES是否通过AdipoQ信号通路调控骨骼肌肌纤维类型转化的作用机制。结果表明:(1)400mg/kg和600mg/kg组的MyHC1基因表达量极显著高于对照组和200mg/kg组;200mg/kg组MyHC2a基因表达量显著高于对照组，400mg/kg和600mg/kg组极显著高于对照组;与对照组相比，200mg/kg和600mg/kg组MyHC2b的mRNA表达量显著降低，400mg/kg组极显著降低。(2)与肌纤维类型相关的能量代谢酶活（苹果酸脱氢酶MDH、乳酸脱氢酶LDH和琥珀酸脱氢酶SDH）方面:与对照组相比，200mg/kg组的MDH酶活无明显变化，400mg/kg和600mg/kg组极显著升高;对照组和200mg/kg组之间的SDH酶活无显著差异，400mg/kg和600mg/kg组的SDH酶活均极显著高于对照组和200mg/kg组;与对照组相比，日粮中添加RES能够显著降低背最长肌LDH的活性。由此可见，日粮中添加适量的RES能够调控猪骨骼肌肌纤维类型从酵解型向氧化型转化，其中，400mg/kg和600mg/kg组能达到最佳效果。(3)AdipoQ信号通路关键基因表达的检测方面，400mg/kg和600mg/kg组猪的背最长肌中AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2、AMPKα1、SIRT1基因的表达量均极显著高于对照组和200mg/kg组;与对照组相比，RES组背最长肌中AMPKα2的mRNA表达量极显著升高，且400mg/kg组的表达量极显著高于200mg/kg和600mg/kg组;400mg/kg和600mg/kg组PGC-1α基因的表达量极显著高于对照组和200mg/kg组，200mg/kg组显著高于对照组，400mg/kg和600mg/kg组无显著差异。同时，检测关键蛋白的表达量发现:试验组的蛋白表达量都高于对照组，其中AdipoQ蛋白表达量是随着RES添加量的增加而升高，400mg/kg组和600mg/kg组的AdipoR1、AMPKα、PGC-1α的蛋白表达量均显著高于对照组，与上述荧光定量结果一致。由此可看出，RES能够上调AdipoQ信号通路上关键基因的表达，其中，400mg/kg和600mg/kg组调控效果最为明显。
3、细胞水平研究RES通过AdipoQ信号通路调控肌纤维类型基因表达的作用机制
(1)利用pLV-AdipoQ重组慢病毒质粒转染猪骨骼肌卫星细胞，结果显示，过表达AdipoQ基因后，AdipoR1、AdipoR2、AMPKα1、AMPKα2、PGC-1α、SIRT1基因的表达均显著上升。(2)用AdipoR1-shRNA慢病毒感染猪骨骼肌卫星细胞，结果显示，干扰AdipoR1基因后，AdipoR1、AMPKα1、AMPKα2、PGC-1α、SIRT1均具有下降趋势，AdipoQ、AdipoR2无明显变化。以上结果说明，AdipoQ是与其受体1结合，调控下游基因AMPKα1、AMPKα2、SIRT1、PGC-1α的表达。(3)RES干预猪骨骼肌卫星细胞并诱导分化的试验结果显示，RES干预后，AdipoR1、AdipoR2、AMPKα1、AMPKα2、PGC-1α、SIRT1、MyHC1、MyHC2a基因的表达水平均显著上升，MyHC2b基因表达水平显著下降。由此说明，RES具有通过上调AdipoQ信号通路调控肌纤维类型从酵解型向氧化型转化的作用。
综合体内和体外实验结果表明，RES激活AdipoQ-AdipoR1-AMPK-SIRT1-PGC-1α信号通路，调控猪骨骼肌肌纤维类型从酵解型向氧化型转变，达到改善猪肉品质的作用。在杜长大猪肥育期65kg-110kg体重阶段，综合考虑改善猪肉品质的最佳效果及最低饲养成本，日粮中RES的适宜添加量为400mg/kg。
1、日粮中添加RES对生长肥育猪生长性能、胴体性状和肉质指标的影响
本试验选用24头65kg左右的杜×长×大三元杂交猪作为试验动物，设四个处理组:对照组（饲喂基础日粮）、200mg/kg组(饲喂基础日粮+200mg/kg RES)、400mg/kg组（饲喂基础日粮+400mg/kg RES）、600mg/kg组（饲喂基础日粮+600mg/kg RES），每组6头猪，在猪体重到110kg时屠宰取样。结果表明:(1)与对照组相比，日粮中添加RES对生长肥育期杜长大猪的生长性能、胴体性状以及血液指标方面没有显著性影响。(2)在肉质方面，三个试验组的肉色评分均显著上升;400mg/kg和600mg/kg组的肌肉电导率以及剪切力指标均显著低于对照组和200mg/kg组;400mg/kg和600mg/kg组的肌内脂肪含量显著高于对照组和200mg/kg组。由此可见，日粮中添加适量的RES能够明显改善猪背最长肌的颜色，降低肌肉剪切力和电导率，提高肌内脂肪含量，这说明RES具有改善猪肉品质的作用。其中，400mg/kg和600mg/kg添加量能达到改善肉质的最佳效果。
2、日粮中添加RES对猪骨骼肌肌纤维类型转化调控作用的研究
本试验采用上述饲养试验猪的背最长肌组织样品进行检测，旨在探讨日粮中添加RES对肥育猪背最长肌肌纤维类型、能量代谢酶活的影响，以及RES是否通过AdipoQ信号通路调控骨骼肌肌纤维类型转化的作用机制。结果表明:(1)400mg/kg和600mg/kg组的MyHC1基因表达量极显著高于对照组和200mg/kg组;200mg/kg组MyHC2a基因表达量显著高于对照组，400mg/kg和600mg/kg组极显著高于对照组;与对照组相比，200mg/kg和600mg/kg组MyHC2b的mRNA表达量显著降低，400mg/kg组极显著降低。(2)与肌纤维类型相关的能量代谢酶活（苹果酸脱氢酶MDH、乳酸脱氢酶LDH和琥珀酸脱氢酶SDH）方面:与对照组相比，200mg/kg组的MDH酶活无明显变化，400mg/kg和600mg/kg组极显著升高;对照组和200mg/kg组之间的SDH酶活无显著差异，400mg/kg和600mg/kg组的SDH酶活均极显著高于对照组和200mg/kg组;与对照组相比，日粮中添加RES能够显著降低背最长肌LDH的活性。由此可见，日粮中添加适量的RES能够调控猪骨骼肌肌纤维类型从酵解型向氧化型转化，其中，400mg/kg和600mg/kg组能达到最佳效果。(3)AdipoQ信号通路关键基因表达的检测方面，400mg/kg和600mg/kg组猪的背最长肌中AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2、AMPKα1、SIRT1基因的表达量均极显著高于对照组和200mg/kg组;与对照组相比，RES组背最长肌中AMPKα2的mRNA表达量极显著升高，且400mg/kg组的表达量极显著高于200mg/kg和600mg/kg组;400mg/kg和600mg/kg组PGC-1α基因的表达量极显著高于对照组和200mg/kg组，200mg/kg组显著高于对照组，400mg/kg和600mg/kg组无显著差异。同时，检测关键蛋白的表达量发现:试验组的蛋白表达量都高于对照组，其中AdipoQ蛋白表达量是随着RES添加量的增加而升高，400mg/kg组和600mg/kg组的AdipoR1、AMPKα、PGC-1α的蛋白表达量均显著高于对照组，与上述荧光定量结果一致。由此可看出，RES能够上调AdipoQ信号通路上关键基因的表达，其中，400mg/kg和600mg/kg组调控效果最为明显。
3、细胞水平研究RES通过AdipoQ信号通路调控肌纤维类型基因表达的作用机制
(1)利用pLV-AdipoQ重组慢病毒质粒转染猪骨骼肌卫星细胞，结果显示，过表达AdipoQ基因后，AdipoR1、AdipoR2、AMPKα1、AMPKα2、PGC-1α、SIRT1基因的表达均显著上升。(2)用AdipoR1-shRNA慢病毒感染猪骨骼肌卫星细胞，结果显示，干扰AdipoR1基因后，AdipoR1、AMPKα1、AMPKα2、PGC-1α、SIRT1均具有下降趋势，AdipoQ、AdipoR2无明显变化。以上结果说明，AdipoQ是与其受体1结合，调控下游基因AMPKα1、AMPKα2、SIRT1、PGC-1α的表达。(3)RES干预猪骨骼肌卫星细胞并诱导分化的试验结果显示，RES干预后，AdipoR1、AdipoR2、AMPKα1、AMPKα2、PGC-1α、SIRT1、MyHC1、MyHC2a基因的表达水平均显著上升，MyHC2b基因表达水平显著下降。由此说明，RES具有通过上调AdipoQ信号通路调控肌纤维类型从酵解型向氧化型转化的作用。
综合体内和体外实验结果表明，RES激活AdipoQ-AdipoR1-AMPK-SIRT1-PGC-1α信号通路，调控猪骨骼肌肌纤维类型从酵解型向氧化型转变，达到改善猪肉品质的作用。在杜长大猪肥育期65kg-110kg体重阶段，综合考虑改善猪肉品质的最佳效果及最低饲养成本，日粮中RES的适宜添加量为400mg/kg。