碳纳米管的功能化、毒性及用作疼痛基因载体的初步研究

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Konca
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:制备功能化单壁碳纳米管混悬液;评估碳纳米管的细胞毒性;评价鞘内注射功能化单壁碳纳米管/NR2B-siRNA复合物对福尔马林炎性痛小鼠的基因沉默效果。方法:(1)先用表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和超声方法,分散修饰不溶于水的单壁碳纳米管(SWNT)和羧基化单壁碳纳米管(SWNT-COOH)形成功能化单壁碳纳米管(f-SWNT)混悬液,将功能化单壁碳纳米管与NR2B-siRNA以不同质量比混合,静置后高速离心,取上清液行琼脂糖凝胶电泳,通过凝胶成像系统检测功能化单壁碳纳米管与NR2B-siRNA的结合情况。(2)培养Hela细胞,用细胞活力(MTT)法和细胞凋亡实验(Hochest33342)评估SWNTs、SWNT-COOH、CTAB及SWNT-COOH/CTAB的细胞毒性。(3)选取雄性C57BL/6小鼠40只,体重18-22kg,随机分为4组(n=10):空白组(C组),阴性对照组(N组),实验组(A组),阳性对照组(P组)。分别行鞘内注射,七天后建立福尔马林炎性痛小鼠模型,测定术后1h自发痛行为学改变,取脊髓L4-6节段采用RT-PCR法检测NR2BmRNA表达。结果:(1)表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)修饰羧基化单壁碳纳米管能形成较稳定的功能化单壁碳纳米管混悬,功能化单壁碳纳米管(f-SWNTs)能与NR2B-siRNA很好地结合,且达到饱和时二者结合的质量比为1:1.5-1:2之间。(2)材料学检查表明SWNTs含有更多的金属杂质;细胞活力和细胞凋亡实验发现羧基化修饰的单壁碳纳米管(SWNT-COOH)比原始单壁碳纳米管(SWNTs)毒性小,浓度曲线显示表面活性剂修饰后的羧基化单壁碳纳米管的毒性与表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)相关,在低浓度范围(0.5-50μg/ml)内CTAB和SWNT-COOH/CTAB基本无细胞毒性(细胞毒性分级为0-1级)。(3)对于福尔马林所致的Ⅰ相急性痛,所有组间的急性期伤害性反应无差别(P>0.05),阳性对照组(P组)和实验组(A组)小鼠对福尔马林所致的Ⅱ相痛的伤害性反应显著降低(P<0.02);阳性对照组(P组)和实验组(A组)小鼠脊髓NR2BmRNA表达均低于其他对照组(P<0.05)。结论:(1)十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)能较好地分散羧基化单壁碳纳米管(SWNTs)形成功能化单壁碳纳米管混悬液(f-SWNTs), f-SWNTs能与siRNA很好地结合。(2)单壁碳纳米管经羧基化后可降低毒性,SWNT-COOH/CTAB的细胞毒性存在剂量依赖性,在低浓度范围内(0.5-50μg/ml),基本无毒性,可以安全使用(细胞毒性分级为0-1级)。(3)鞘内注射功能化单壁碳纳米管用作基因载体能有效转染NR2B-siRNA,抑制小鼠脊髓NR2BmRNA的表达,减轻福尔马林Ⅱ相痛行为学。
其他文献
在发达国家,服务业在促进就业方面的贡献已超过了70%。该产业近几十年的迅速增长引起了越来越多学者对它的关注。然而很显然,在研究对就业的促进作用时,如果还将就业简单地分
清唱剧(oratorio)是一种音乐戏剧形式,诞生于16世纪末的意大利。它是通过讲述圣经故事来表达信仰的大型声乐体裁,其音乐形式包括独唱、重唱、合唱,但演出时没有布景、化装和
<正> 水肿是临床上常见的症状,凡是体内水湿贮留,泛滥肌肤,引起头面、目窠、胸腹、四肢,甚至全身浮肿者,皆属水肿。它包括现代医学的急、慢性肾炎、心力衰竭、慢性肝病、营养
通过回顾西安市森林旅游产业20年的发展历程,和对近10年间西安市森林公园旅游收入增长率与全市旅游收入、全市居民可支配收入等数据的对比,发现西安市森林旅游收入增长率低于
商标权扩张与限制是目前商标法律制度发展过程中出现的两大现象,本文拟通过研究商标的功能提升,追溯商标权发展的历史以及总结当前商标法律制度的发展和变化,以分析、列举以及对
<正> 笔者运用清热解毒药外洗治疗皮肤病8例,其中阴囊湿疹2例,臀部湿疹2例,慢性皮炎4例,均取得较为满意的疗效。药物组成:地肤子、马齿苋、板兰根、茵陈蒿、艾叶各40克,鱼腥
研究背景股骨头坏死(osteonecrosis of femoral head, ONFH)是由于股骨头局部血运不良,从而引起骨细胞缺血、坏死、骨小梁断裂、股骨头塌陷的一种病变,病因大致可以分为创伤
目的:通过对单纯二尖瓣置换手术前后左心室舒张期末内径(LVEDD)和左室射血分数(LVEF)的分析,观察二尖瓣狭窄和关闭不全两种不同病理改变对瓣膜置换手术后早期左室功能的影响。方
目的:探讨姜黄素对小鼠急性脊髓损伤后后肢运动功能及NF-κB表达的影响,为临床治疗急性脊髓损伤提供实验数据。方法:采用改良Allen’s法建立小鼠急性脊髓损伤的实验动物模型,将
洛阳龙门地热田的形成是其特殊地质构造制约地下水运动和热对流的结果,与区域性深大断裂直接贯通的F1、F2断层为龙门地热田的控热构造,F3、F41为地热田的导热、导水构造,ε3