论文部分内容阅读
目的:研究霉茶总黄酮和霉茶蛋白对SHR大鼠血压的作用并探讨其作用机制,为今后霉茶资源的开发利用提供依据。方法:1、霉茶总黄酮与霉茶蛋白对SHR大鼠血压的影响研究1.1单次给药对SHR大鼠血压的影响健康SHR大鼠35只(雄性,7周龄),按体重随机分为7组,每组5只:即模型组、霉茶总黄酮(低、中、高剂量)组、霉茶蛋白(低、高剂量)组、复方罗布麻片组,每组5只。大鼠适应性饲养及血压测量训练1W后,每天上午9点开始实验,每天一组,监测灌胃前和灌胃后大鼠的血压变化,灌胃容量为10 mL·kg-1体重,模型组大鼠灌胃给予等容量蒸馏水,霉茶总黄酮低、中、高剂量组剂量分别为90 mg·kg-1、180 mg·kg-1、360 mg·kg-1,霉茶蛋白低、高剂量组剂量分别为70 mg·kg-1、140mg·kg-1,复方罗布麻片组剂量为0.05 g·kg-1,灌胃后每隔15 min测量该大鼠的血压。1.2多次给药对SHR大鼠血压的影响健康SHR大鼠(雄性7周龄,SPF级)70只,按体重随机分为7组:即模型组、霉茶总黄酮(低、中、高剂量)组、霉茶蛋白(低、高剂量)组、复方罗布麻片组,每组10只。大鼠适应性饲养及血压测量训练3 W后,模型组大鼠灌胃给予等容量蒸馏水,灌胃容量为10 mL·kg-1体重,霉茶总黄酮低、中、高剂量组剂量分别为90 mg·kg-1、180 mg·kg-1、360mg·kg-1,霉茶蛋白组低、高剂量组剂量分别为70 mg·kg-1、140 mg·kg-1,复方罗布麻片组剂量为0.05 g·kg-1,各组大鼠每天灌胃给药2次,连续灌胃7周,每周测量各组大鼠血压并记录。末次给药前12 h禁食不禁水。末次给药后1 h颈总动脉取血,取血后迅速钝性剥离肾脏和心脏组织,用滤纸吸干水分,精密称重,计算脏器指数(脏器指数=脏器质量/体质量),取部分组织用4%多聚甲醛溶液固定,进行HE染色切片,然后在光学显微镜下观察组织形态结构。2.霉茶总黄酮和霉茶蛋白对SHR大鼠降压作用机制的研究分组和给药方法同1.2项。末次给药后1 h颈总动脉取血,留取血清检测血清中NO、ET-1和GSH-PX、SOD、MDA的含量,取血后迅速钝性剥离肾脏和心脏组织,用滤纸吸干水分,取部分组织-80℃保存,作为实时荧光定量PCR实验样本,检测肾脏组织TLR-4、IL-6、TNF-α和心脏组织ACE、AngⅡ、CYP11B2的表达量。结果:1单次给药实验结果显示:各给药组在灌胃后30 min后均可降低SHR大鼠的血压,其中霉茶蛋白在30 min左右降压效果最明显,霉茶总黄酮在1 h左右降压效果最明显,整个降压过程可以持续约75 min。2多次给药实验结果显示:与模型组比较,霉茶总黄酮(低、中、高剂量)组,霉茶蛋白(低、高剂量)组,复方罗布麻片组均可明显的降低SHR大鼠的血压。虽然霉茶总黄酮和霉茶蛋白对大鼠的脏器系数影响不明显,但是病理切片结果显示霉茶总黄酮高、中剂量组,霉茶蛋白高剂量组和复方罗布麻片组对SHR大鼠的肾脏、心脏组织结构具有一定的保护作用。3血清学检测结果显示:与模型组比较,霉茶总黄酮(中、高剂量)组,霉茶蛋白高剂量组,复方罗布麻片组,NO含量明显增加(P<0.01),而ET-1含量显著降低(均为P<0.01);与模型组比较霉茶总黄酮(低、中、高剂量)组,霉茶蛋白(低、高剂量)组,复方罗布麻片组GSH-PX、SOD活力水平升高(均为P<0.05);与模型组比较霉茶总黄酮(中、高剂量)组,霉茶蛋白高剂量组,复方罗布麻片组血清中MDA的含量明显降低(均为P<0.01)。4实时荧光定量PCR结果显示:与模型组比较,霉茶总黄铜高剂量、中剂量,蛋白高剂量TLR-4、IL-6、TNF-α、ACE、AngⅡ、CYP11b2的mRNA的表达量明显降低(均为P<0.05)。结论:1、霉茶总黄酮和霉茶蛋白单次给药均可降低SHR大鼠血压,降压作用可持续1 h左右;连续多次给药能显著降低SHR大鼠的血压,并能改善肾脏和心脏组织的病理改变。2、霉茶总黄酮和霉茶蛋白降压作用机制可能是与其能够增加血清中NO的含量,降低血清中ET-1的含量,下调心脏组织中ACE和AngⅡ的mRNA表达,同时其具有明显的抗氧化和抗炎作用有关。