【摘 要】
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背景与目的树突状细胞(DC)是目前已知的体内功能最强的抗原呈递细胞,在其成熟过程中,实现肿瘤抗原的摄取与递呈、激活初始T淋巴细胞、启动机体免疫应答,产生特异性细胞毒性T
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背景与目的树突状细胞(DC)是目前已知的体内功能最强的抗原呈递细胞,在其成熟过程中,实现肿瘤抗原的摄取与递呈、激活初始T淋巴细胞、启动机体免疫应答,产生特异性细胞毒性T淋巴细胞,由后者杀灭肿瘤细胞,在体内抗肿瘤免疫治疗中发挥着有重要作用。在这一系列复杂过程中,DC细胞结构是否产生以及产生何种相应的变化以适应上述细胞功能变化的需要,是本实验的切入点。本课题选取小鼠树突状细胞成熟前后,细胞内外超微结构的一系列适应性变化进行探索性研究。方法使用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)诱导小鼠骨髓单个核细胞分化为未成熟树突状细胞,倒置相差显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面标志,在经脂多糖刺激48小时成熟前后,透射电镜下观察成熟前后树突状细胞超微结构并,比较分析树突状突起、细胞内核糖体、线粒体分布情况及细胞核直径变化情况。结果细胞培养至3、5、7天,经倒置相差显微镜观察,可见部分细胞表面呈现树枝样突起改变,培养至5天,经流式细胞仪检测证实细胞表面标志CD80、CD86、CD11C、MHC-II等不同程度的表达,从细胞形态和表面标志两个方面,证实了小鼠树突状细胞的诱导成功,后期经脂多糖刺激成熟后,树突状细胞表面树枝状突起明显减少,细胞内线粒体、核糖体持续增多,同时细胞核直径增大。结论树突状细胞表面突起的分布状态,可能决定了抗原呈递能力的大小,同时也是细胞功能潜力及状态的一种潜在标尺。
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