背景:妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）是妊娠期特有的一种肝内疾病,常发生于妊娠中晚期。ICP的发生对母体和胎儿都会产生不良影响,特别是胎儿,严重的会造成胎儿的早产甚至死亡。目前人们对ICP的病因及其发病机制尚不明确,已知遗传、环境和激素等都是该疾病发生的因素。本课题组前期针对马鞍山出生队列进行了孕早期邻苯二甲酸酯（PAEs）暴露与ICP的关联分析,研究发现,孕早期母体PAEs暴露是ICP的新的环境危险因素,而邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）是目前应用最广泛的邻苯二甲酸酯增塑剂之一,因此实验中选择探究小鼠孕期DEHP暴露是否会导致ICP的发生。法尼醇X受体（FXR）作为一种胆汁酸受体,在胆汁酸代谢过程中起到重要作用。奥贝胆酸（OCA）是人工合成的FXR激动剂,本实验室前期研究表明OCA对孕期细菌脂多糖（LPS）暴露导致胆汁酸代谢紊乱以及雌二醇（E2）诱导的ICP均有保护作用,而OCA对孕期DEHP暴露导致ICP的发生是否有保护作用值得进一步探讨。目的:探讨小鼠孕期DEHP暴露能否导致ICP,以及OCA后处理对小鼠孕期DEHP暴露诱发的ICP是否有保护作用。方法:实验一:将24只ICR孕鼠随机分为2组,分别为对照组和DEHP模型组。对照组灌胃玉米油,DEHP暴露量为200 mg/kg/d,造模时间为GD0-GD17。在GD17灌胃结束后禁食6小时,收集血液与肝脏组织,检测母血中总胆汁酸（TBA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）以及母肝中TBA水平,HE染色观察母肝病理变化。实验二:将48只ICR孕鼠随机分为4组,分为对照组、OCA组、DEHP模型组、DEHP+OCA后处理组,DEHP暴露量为200 mg/kg/d,灌胃时间为GD0-GD17每天早上9点,OCA组和DEHP+OCA组中OCA灌胃时间为第GD12-17每天早上7点,灌胃剂量5mg/kg/d。在GD17 DEHP灌胃结束后禁食6小时,收集血液与肝脏组织,检测母血与母肝中TBA水平,HE染色观察母肝病理变化,LC-MS/MS检测母血与母肝中各胆汁酸组分;Western blot检测母肝中胆汁酸代谢相关蛋白FXR、CYP7A1、CYP3A11表达水平;RT-q PCR检测母肝中SHP、NTCP、BCRP、CYP7A1、CYP8B1、CYP3A11 m RNA表达水平。结果:实验一:模型组孕期DEHP暴露后母鼠的肝脏质量和肝重指数明显增加。生化结果表明,孕期DEHP暴露后母血与母肝中TBA水平明显升高。肝脏组织病理结果显示,孕期DEHP暴露后母肝中可见汇管区扩大,胆管变形以及胆管增生,胆管周围并伴有少量炎性细胞浸润。结果表明孕期DEHP暴露可导致ICP,造模成功。实验二:与DEHP模型组相比,OCA后期处理后母鼠肝脏质量和肝重指数以及血清和肝脏中的TBA水平均降低。肝脏组织病理结果显示,母鼠肝脏组织形态明显改善。结果表明OCA后期处理对孕期DEHP暴露导致的ICP有明显保护作用。LC-MS/MS检测结果表明,孕期DEHP暴露后母血中CA、CDCA、TCA、GCA四种初级胆汁酸组分和UDCA、TDCA两种次级胆汁酸组分和母肝中TCDCA、GCA、CA、CDCA、TCA五种初级胆汁酸组分和TUDCA、UDCA、TDCA三种次级胆汁酸组分均明显升高,且OCA后期处理后母血和母肝中各胆汁酸组分均显著降低;Western blot结果表明,孕期DEHP暴露明显抑制母肝中胆汁酸受体FXR核蛋白和胆汁酸分解酶CYP3A11的总蛋白表达,同时显著增加肝脏中胆汁酸合成酶CYP7A1总蛋白水平,OCA后期处理后明显上调了母肝中FXR核蛋白和CYP3A11总蛋白水平,同时降低了肝脏中CYP7A1总蛋白的水平;RT-q PCR结果表明,孕期DEHP暴露后母肝中FXR靶基因SHP以及CYP3A11和胆汁酸转运体NTCP、BCRP的m RNA水平降低,母肝中CYP7A1和CYP8B1的m RNA水平著增加,OCA后期处理后母肝中SHP、CYP3A11、NTCP、BCRP的m RNA水平增加,母肝中CYP7A1和CYP8B1的m RNA表达水平显著降低。结论:小鼠孕期DEHP暴露后通过抑制FXR信号通路导致ICP,且FXR激动剂OCA后期处理对孕期DEHP暴露导致ICP有明显的保护作用。