C-反应蛋白在脲变性过程中的折叠及其生物信息学分析

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C-反应蛋白(CRP)是一种经典的急性期反应蛋白,存在至少两种异构体:五聚体(pCRP,nCRP)和单体(mCRP)。两种异构体之间的变构转换构成了CRP功能多效性的结构基础。我们以时间梯度脲变性CRP,监测CRP解折叠的动态过程,发现了CRP的两种折叠中间体(CRPi和mCRPi)。我们在前人研究的基础之上进一步细化了CRP解折叠的过程。其中,CRPi丧失了五聚体组装形式但仍表达1D6抗原性,成为一种新的、独特的CRP异构体。CRP折叠中间体的发现及CRP折叠过程的描述为CRP不同异构体之间的转换调节提供了理论基础,也为解释CRP多面性开辟了新的途径,具有重要的生理意义。另外,我们通过比对CRP及同是五聚物家族的SAP的一级序列并对其做了多种属保守性分析,同时通过mCRP单体及其突变体的同源建模比对分析,找出了可能影响CRP五聚体折叠组装的重要元件:Ca结合loop(136-150)、二硫键、Ser45Thr46、 LNWRA(185-189)、strand G(80-85)及CRP信号肽。我们还通过比对CRP、SAP和同是急性期反应蛋白的SAA中的转录调控元件并对其作了多种属保守性分析,找出了调控CRP急性期表达的关键转录元件:p50*p50、C/EBP及CREBH。CRP的生物信息学分析为CRP五聚体的折叠组装研究及其急性期表达调控提供了实验方向,具有重要的理论指导意义。
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