【摘 要】
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本试验从能够特异性识别ssRNA(single strand RNA)的模式识别受体TLR7及其信号转导入手,对属于ssRNA病毒的NDV引起CEF凋亡机制进行研究。首先,采用Trizol法抽提NDV感染组和正
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本试验从能够特异性识别ssRNA(single strand RNA)的模式识别受体TLR7及其信号转导入手,对属于ssRNA病毒的NDV引起CEF凋亡机制进行研究。首先,采用Trizol法抽提NDV感染组和正常对照组CEF总RNA,反转录成cDNA。根据GenBank上已发表的chTLR7、chMyD88、chIFN-α和chIL-2基因序列,在保守区设计各自特异性引物。以chp-actin基因为内参,采用实时荧光定量PCR法检测CEF中chTLR7、 chMyD88、chIFN-α和chIL-2基因表达的动态变化。结果发现,CEF感染NDV后12h、24h、36h和48h,其chTLR7表达量与对照组比较差异极显著(P<0.01),除24h外,表达量均显著高于对照组；chMyD88表达量均较对照组明显升高(P<0.05或P<0.01)；chIFN-α表达量除在24h与对照组差异不显著(P>0.05)外,其余均较对照组显著升高(P<0.01)；chIL-2表达量也均较对照组明显升高(P<0.05或P<0.01)。CEF感染NDV后,chTLR7及其下游信号分子表达所呈现出的动态变化表明,chTLR7参与了NDV感染CEF的早期过程。其次,根据GenBank已发表的chTLR7序列设计引物,成功克隆了chTLR7胞外区基因片段,大小为1122bp,同时成功构建了pGEX-6P-1-chTLR7原核表达质粒,其表达蛋白大小约为63KDa。利用此重组蛋白制备兔抗chTLR7多克隆抗体,经Western blotting及间接免疫荧光试验证明,制备的兔抗chTLR7多克隆抗体具有良好的特异性。将此抗体与培养的CEF作用,阻断CEF细胞内的chTLR7受体后再感染NDV,检测CEF凋亡的变化情况。结果发现,在NDV感染后48h,使用25倍稀释chTLR7多抗处理的CEF,细胞凋亡数量明显减少,且与NDV感染组比较差异极显著(P<0.01)；28倍稀释chTLR7多抗处理的CEF,细胞凋亡数量较NDV感染组显著减少(P<0.05)；而应用2112倍稀释chTLR7多抗处理的CEF,细胞凋亡率与NDV感染组比较未见统计学差异(P>0.05)。结果提示,CEF感染NDV后,其细胞凋亡可能是通过chTLR7介导的。本试验从基因和蛋白表达水平证实,chTLR7参与了NDV感染CEF过程,且在NDV诱导CEF凋亡中发挥重要作用。该研究为进一步探讨chTLR7参与NDV致病的分子机制奠定基础,同时也为综合防治ND提供了新思路。
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摘 要： 在语文教学中，识字、阅读、习作、口语交际都与现实生活紧密相连。如何实现小语课堂的生活化呢？作者认为应从以下方面入手：教学环境生活化；教学内容生活化；教学语言生活化；教学方法生活化；体验形式生活化。 关键词： 生活化策略 小学语文课堂 生活化教学 陶行知先生说：“生活教育是生活所原有，生活所自营，生活所必需的教育。”在我们的语文教学中，识字、阅读、习作、口语交际都与现实生活紧密相连。可
一日之计在于晨 一年之计在于春 一生之计在于勤 一家之计在于和 一国之计在于富 ——作者题记 从1978年到1998年,这是我国大变革、大变化的二十年。也是我从四十岁到六十岁
在高三进行数列专题复习时，经常遇到求数列的最大项、最小项及求某一项的最大值或最小值等问题，本文结合具体例题将其几种类型及解法叙述如下. 一、归纳—猜想—证明 例1.在数列{a }中，a =2，a =λa λ （2-λ）·2 （n∈N ），其中λ>0. （1）证明：{ -（ ） }为等差数列，并求数列{a }的通项公式； （2）证明：存在k∈N ，使得 ≤ 对任意n∈N 均成立. 解：
一、两种不同心态的写作 有这样一种奇怪的现象：学生的周记、随感一般要比他们的课堂作文写得好，甚至同一个学生在同一周内，周记、随感和课堂作文的质量也相当悬殊。这是为什么呢？我曾思考过这个问题，也曾做了归因分析，但是总觉得没有找到最根本、最关键的因素，以致收效不大。听了苏州大学陶新华副教授有关“积极心理学”的讲座，再结合相关心理学专著，我觉得似乎找到了原因。那就是：学生写周记、随感和写课堂作文，是在
摘 要： 作文教学是语文教学的一个重要组成部分，是提高学生语文素质的主要途径，是培养学生创新能力的沃土。长期以来，作文教学效率不高，学生作文模式化、空洞化，甚至很多学生谈“文”色变，对作文写作存在畏惧心理。但作文作为语文的半壁江山，需要学生足够重视。本文从构建和谐融洽的师生关系；巧设情境、激发兴趣；教会学生积累写作素材；将作文教学贯穿于平时的课堂教学中；让学生参与作文评改，在合作交流中提高作文水平
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摘 要： 在数学教学中，教师引导学生在数学知识的形成过程中养成学习反思习惯、在数学知识的运用过程中反思习惯，有利于学生在反思中形成系统的知识结构，提高解题能力。 关键词： 数学教学 反思 解题过程 问题变式 解题方法 “学贵有疑”。学习不反思，就很难深入学习的能力和求异、创新的品质。在平时教学中，我们经常听到老师这样抱怨：这道题刚刚讲过，学生又做得一塌糊涂。而学生也常拍着脑袋喊冤：这题我已经做
科学贮存棉种鄢陵县棉烟办轩志敏棉花良种不仅要留足，还要做到科学贮存，确保种子活力，为次年种足种好棉花提供保障。一、做好贮前处理加工后的棉籽，一般含水量２０ｇ左右，存放１—２个月就基
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