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黑老虎[Kadsura coccinea(Lem.)A.C.Smith]是五味子科 Schisandraceae一种集食用、观赏和药用于一体的极具开发潜力的珍稀野生植物,其果实是开发潜力较大的药食两用型水果。海南产黑老虎藤茎可用于食品保鲜、保健和改善风味,但对于其成分和功效的研究则比较少,为了丰富黑老虎的化学成分,同时发现活性物质,解释其保鲜原理和保健功效,为黑老虎资源的利用和相关产品的开发提供理论依据和科学指导,本实验对黑老虎藤茎中乙醇提取物的石油醚萃取部分化学成分进行提取、分离和结构鉴定,并对提取物和单体化合物进行了抗菌活性、抑制乙酰胆碱酯酶和α-糖苷酶的测试。本研究通过多种柱色谱技术从黑老虎藤茎乙醇提取物的石油醚萃取部分分离纯化得到23个单体化合物,并利用多种波谱学方法结合各单体化合物的理化性质,分别将其结构解析为:黑老虎酸A(kaccinic acid A)(1)、环阿屯酮(cycloartenone)(2)、24-methyl-8-lanoten-3-one(3)、(22Z,24E)-3-oxoprotosta-27 12,22,24-trien-26-oic acid(4)、cubenol(5)、(+)-T-cadinol(6)、(+)-(1S,4R)-7-羟基去氢白菖烯(7)、guaia-1(5),7(8),9(10)-triene(8)、泽泻醇(alisol)(9)、guai-3-en-10α-ol(10)、别香橙烯-4β,10α-diol(11)、石竹烯氧化物(12)、arisantetralone B(13)、kadsuralignan C(14)、neglectalignans D(15)、binankadsurin A(16)、wilsonilignan B(17)、yunnankadsurin B(18)、guayacasin(19)、2A2,4-十一烷酸甘油酯(20)、2△2,4-十四烷酸甘油酯(21)、十二烷酸乙酯(ethyl dodecanoate)(22)和甘油丙酯(23)。其中,化合物1为新的羊毛甾烷型三萜类化合物,化合物3和19为新的天然产物,化合物4、5、7、8、9、10、11和12均为首次从黑老虎中分离得到。采用滤纸片法测定了化合物2、3、6-9、11-15、17、19和21对金黄色葡萄球菌(Staphylococcur aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)和白色念珠球(Candida albicans)的生长抑制活性,结果表明化合物9、11、12、13、15和18对金黄色葡萄球菌具有较好的抑制活性,其中化合物18表现出显著的抑制活性,抑菌圈直径为10.26±0.1 1mm。化合物13对大肠杆菌也具有一定抑制活性,抑菌圈的直径为7.83±0.13mm。所测化合物中对白色念球菌均无抗菌活性。通过Ellman法和优化后的PNPG法对化合物1、4、5、7、8、10、13、14、16、18、20和22进行乙酰胆碱酯酶及α-葡萄糖苷酶抑制活性测试。实验结果表明,化合物14、16和20具有微弱的乙酰胆碱酯酶抑制活性;化合物1、4和7具有中等抑制活性,抑制率分别为32.77±0.3%、25.75±0.4%和32.72±0.3%。化合物1对α-葡萄糖苷酶具有抑制活性,抑制率为46.69%±0.6%,接近于阳性对照阿卡波糖的抑制率。