硫酸氨基葡萄糖对白细胞介素1β诱导人骨关节炎软骨细胞合成前列腺素E2和一氧化氮的影响

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目的 研究硫酸氨基葡萄糖对白细胞介素1β(Interleukin 1β,IL-1β)诱导体外培养的人骨关节炎软骨细胞合成前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和一氧化氮(nitric oxide,NO)的影响及其作用机制。 方法 取10例骨关节炎患者接受全膝关节置换术的的股骨髁和胫骨平台软骨标本,酶消化法获取软骨细胞进行体外培养。在原代或第二代的人骨关节炎软骨细胞(human osteoarthritic chondrocytes,HOC)培养液中加入IL-1β(5ng/ml)和不同浓度的硫酸氨基葡萄糖(0.2mmol/1,2mmol/1,20mmol/1)作用24小时,首先应用ELISA法检测细胞上清中的PGE2,白介素1受体抗体(Interleukin-1 receptor antagonist,IL-1Ra),硝酸还原酶法检测细胞上清中的NO的含量,然后应用RT-PCR法和Western蛋白印迹法分别检测HOC中环氧化酶2(cyclooxygenase 2,COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(inductive nitric oxide synthetase,iNOS)mRNA和蛋白的表达,应用RT-PCR法检测HOC中Ⅱ型白介素1受体(Interleukin-1 receptor type Ⅱ,IL-1RⅡ)的mRNA表达。 结果 IL-1β刺激后HOC合成PGE2和NO增加(P<0.01),表达COX-2、iNOS mRNA和蛋白上调(P<0.01),表达IL-1Ra上调(P<0.01),表达IL-1RⅡ的mRNA下调(P<0.01)。0.2mmol/l,2mmol/和20mmol/l硫酸氨基葡萄糖以浓度依赖的方式抑制IL-1β诱导HOC合成PGE2(P<0.01),抑制IL-1β诱导HOC表达COX-2 mRNA和蛋白上调(P<0.01)。2mmol/和20mmol/l硫酸氨基葡萄糖以浓度依赖的方式抑制IL-1β诱导HOC合成NO(P<0.05),抑制IL-1β诱导HOC表达iNOS mRNA和蛋白的上调(P<0.05),抑制IL-1β诱导HOC表达IL-1RⅡ的mRNA的下调(P<0.05)。但硫酸氨基葡萄糖对软骨细胞合成IL-1Ra无影响(P>
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