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冬青科冬青属苦丁茶(Ilex kudingcha C.J Tseng)为我国南方传统的饮料,同时也是我国南部及西南部民间传统的药用植物,具有清热解毒、生津、提神、益智、抗衰老、调节血压和血脂等功效。苦丁茶主含三萜皂苷类成分,其他成分有甾醇,氨基酸,维生素,脂多糖和多种微量元素。国内外对苦丁茶的研究集中在化学成分和药理方面,提取分离纯化方面未见任何系统报导。故本研究旨在此方面作一种摸索,为此药的后期研究奠定基础。 针对苦丁茶的研究基础与现状,结合具体实验条件,本文优选了超声提取的工艺条件并采用正交设计优选了苦丁茶总皂苷回流提取工艺条件;以苦丁茶总皂苷的静、动态饱和吸附量、洗脱率和精制度为考察指标,系统地研究了大孔吸附树脂富集、纯化总皂苷类成分的吸附性能和洗脱参数以及重复使用周期等。其研究结果主要有: 1.苦丁茶总皂苷超声提取优选出的最佳提取方案为:先以20倍量70%EtOH浸泡60min,然后用频率为20MHz的超声波提取30min。 2.苦丁茶总皂苷回流提取优选出的最佳提取方案为:以12倍量70%EtOH浸泡60min,回流提取3次,每次0.5h。 3.大孔树脂纯化精制工艺研究结果:从静态吸附和静态解吸实验中优选出D101B型大孔吸附树脂作为上柱树脂(静态饱和吸附量为116.2±1.9mg.g(-1)干树脂,静态解吸率为93.1±0.21%)。各项参数优选实验表明:上样液浓度在10-14mg.ml-1,PH值调至6.0—7.0,过柱流速为2BV/h,依次用4BV水、4DV30%EtOH、4BV70%EtOH以2BV/h的流速洗脱,收集70%EtOH洗脱液,即可得到总皂苷含量为61.82±0.32%的产品,且重现性好(RSD:0.52%),精制程度高达247.44%。 结果初步表明,采取超声提取、大孔吸附树脂等制剂工艺新技术、新材料可以提高中药材药效成分的提取分离效率,在中药新药的研制开发中加以推广应用是可行的。