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本研究通过qRT-PCR技术检测成年绵羊和羔羊卵丘细胞内组织蛋白酶（CTSB、CTSS）基因表达规律，Tunel染色并结合流式细胞仪检测卵丘细胞凋亡，研究成熟培养液中添加不同浓度组织蛋白酶特异性抑制剂E-64对卵丘细胞凋亡及卵母细胞发育能力的影响。探究CTSB、CTSS基因表达、绵羊卵丘细胞凋亡与卵母细胞发育能力相关性，以期探索提高绵羊卵母细胞成熟及发育潜能的新途径。研究结果如下：成年绵羊与羔羊卵母细胞体外成熟液中添加不同浓度的E-6（40μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L），分别于体外成熟（IVM）的0h、8h、16h、24h检测组织蛋白酶基因表达量，结果表明：成年绵羊及羔羊卵丘细胞内CTSB、CTSS基因表达量在体外成熟过程中，随时间的延长而逐渐下降；E-64添加组卵丘细胞内CTSB、CTSS基因表达量均在不同程度上低于对照组，其中5μmol/L和10μmol/L组于IVM8h、16h、24h基因表达量与对照组相比，被显著下调（p<0.05），5μmol/L和10μmol/L组间差异不显著（P>0.05）。卵母细胞体外成熟液中添加不同浓度E-64（0μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L），于体外成熟的不同时间点（成年羊于IVM的0h、8h、16h、24h；羔羊于IVM的0h、24h）检测卵丘细胞凋亡，结果表明：成年绵羊与羔羊卵丘细胞累积凋亡率与体外成熟时间呈正相关；成年绵羊体外成熟过程中新生凋亡率呈现先逐渐升高， IVM16h达到高峰，再逐渐降低的规律；成熟液中添加E-64可以下调卵丘细胞的凋亡水平，具有剂量依赖性的特点，添加5μmol/L、10μmol/L E-64对卵丘细胞凋亡的抑制效果显著高于0μmol/L和1μmol/L组（p<0.05），但5μmol/L和10μmol/L E-64组间无显著差异（P>0.05）。将羔羊与成年绵羊卵丘细胞内CTSB、CTSS基因表达量及凋亡进行对比，结果表明，羔羊卵丘细胞内CTSB、CTSS的mRNA表达量均极显著高于成年绵羊（p<0.01）；IVM0h羔羊卵丘细胞累积凋亡率极显著高于成年绵羊（P<0.01）；24h时，对照组羔羊卵丘细胞累积凋亡率显著高于成年羊（P<0.05），5μmol/L、10μmol/L E-64添加组则极显著高于成年羊（P<0.01）。成熟液中添加不同浓度E-64（0μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L），分别培养成年绵羊卵母细胞，成熟后的卵母细胞经体外受精和胚胎发育后，检测各项指标，结果表明：各组卵母细胞成熟率、卵裂率均无显著差异（P>0.05）；5μmol/L和10μmol/LE-64组囊胚率极显著高于对照组（0μmol/L）（P<0.01），但5μmol/L与10μmol/L间无显著差异（P>0.05）。