由于外伤、肿瘤、炎症、老龄化等原因造成的人体硬组织缺损修复,是目前口腔医学及临床医学急待解决的难题。而引导组织再生膜的发现与应用无疑为解决这一难题带来了希望。目前用于临床实践的引导组织再生膜的材料可分为①以聚四氟乙烯(ePTFE)为代表的非降解性材料;②以胶原、聚乳酸(PLA)为代表的降解性材料。非降解性材料制成的引导组织再生膜不仅需要二次手术取出,而且价格昂贵;而用胶原可降解性材料制成的引导组织再生膜虽不需要二次手术取出,但是却存在免疫原性。因此,为克服以上不足之处,本实验依据仿生矿化理论,即在温和的生理条件下,自组装仿生合成一种新型的可降解、具有高度生物活性、促进组织自我修复潜力的新一代引导组织再生膜。即选取海藻酸钠和壳聚糖两种具有高生物活性和组织相容性材料,作为可调控磷灰石晶体生长的基质模板。经构建海藻酸钠/壳聚糖新型骨引导组织再生膜,通过其不断摄取模拟体液(Simulated body fluid,SBF)中的钙磷等离子,在人体硬组织缺损表面发生仿生矿化,诱导羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)晶体生成,以期待解决人体硬组织缺损修复等问题。目的依据仿生矿化原理,构建海藻酸钠/壳聚糖引导组织再生膜摄取模拟体液中的钙磷等离子,诱导羟磷灰石晶体生成,为人体硬组织缺损进行仿生矿化修复提供基础性研究依据。方法选择培养皿作为引导组织再生膜的载体,经冷冻干燥仪处理后形成蜂窝状结构,然后浸入模拟体液中,经37℃恒温水浴箱孵育7d。再经冷冻干燥仪处理成形后,进行扫描电镜观察生成物形貌;薄膜X衍射仪确定生成物的元素和性质;傅立叶红外光谱仪观察生成物的特征峰。结果1.肉眼观察矿化前的引导组织再生膜表面和矿化后的膜表面比较发现,在SBF矿化7d后的引导组织再生膜表面上有可用肉眼观测到的白色物质,且所生成的物质颜色与膜的本身有较明显区别。2. X线衍射仪对矿化后引导组织再生膜表面物质的检测对经冷冻干燥处理后再生膜表面出现的白色物质行X线衍射仪分析,其X线衍射图中出现了羟基磷灰石的晶体特征峰。显示在模拟体液中孵育,海藻酸钠/壳聚糖构建成的引导组织再生膜能诱导生成磷灰石晶体。3.傅立叶红外线光谱仪对矿化前和矿化后引导组织再生膜表面物质的图谱分析仿生矿化7天后的引导组织再生膜表面上出现白色物质进行傅立叶红外线光谱仪检测图谱显示了HA晶体的磷酸根振动谱带的特征峰和碳酸根的吸收峰,这是在未经生物矿化的图谱中所没有的。可见海藻酸钠/壳聚糖构建成的引导组织再生膜表面生成的白色晶体为含碳酸根的羟基磷灰石。4.扫描电子显微镜观察矿化后引导组织再生膜表面物质将引导组织再生膜在模拟体液中进行仿生矿化7天后行扫描电子显微镜观察,放大600倍和10500倍条件下可以看到再生膜表面的空隙大小不等且伴有不规则裂隙空隙以及裂隙内部的网孔结构。在放大1500倍和10500倍条件下,显示再生膜表面生成的白色物质为簇状、板状、块状结构,晶体呈现多样性。结论构建成的海藻酸钠/壳聚糖引导组织再生膜可以摄取模拟体液中的钙磷等离子诱导生成羟磷灰石晶体,可为由于外伤、肿瘤、炎症、老龄化等原因造成的人体硬组织缺损修复提供客观依据。