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目的:1.探究自体SVF对SD大鼠缺血皮瓣的血管形成是否有影响;2.观察短期高糖饮食对SD大鼠缺血皮瓣血管形成的影响;3.探究自体SVF对SD大鼠短期高糖饮食下的缺血皮瓣血管形成是否有影响。方法:(1)为了探究SVF对缺血皮瓣愈合过程中血管形成的影响,我们随机将9只SD大鼠分成3组,分别为空白组、模型组、实验组:空白组大鼠的皮瓣游离3h,模型组与实验组的皮瓣则完全缺血3h,术后空白组及模型组的大鼠在其皮瓣处皮下注射生理盐水1ml,实验组大鼠则注射1ml自体SVF悬浊液。观察各组SD大鼠皮瓣的外观改变,术后进行大体观察,对比各组大鼠的生理活动、精神状态、皮瓣的颜色、肿胀度等;同时采用ELISA法分别检测术后即刻、第三天、第七天缺血皮瓣中IL-6和VEGF的含量;最后在术后第十五天,将皮瓣全层取下采用HE染色,观察组织层面皮瓣愈合过程中血管形成的情况。(2)为了探究短期不同含量高糖饮食对于缺血皮瓣愈合过程中血管形成的影响,首先我们采用不等量的50%葡萄糖模拟不同含量的高糖饮食。再随机将15只SD大鼠分成5组(n=3),分别为空白组、模型组、实验I组、实验II组、实验III组;空白组及模型组术后均给予普通饲料喂养,自由取食水;实验I组、实验II组、实验III组分别在普通饲料自由取食的基础上额外加以每日三次(早8点、午15点、晚22点)灌胃等浓度的葡萄糖溶液。实验I组单日额外摄入3g Glu即每次灌胃2ml 50%葡萄糖溶液,实验II组单日额外摄入6g Glu即每次灌胃4ml 50%葡萄糖溶液,实验III组单日额外摄入9g Glu即每次灌胃6ml 50%葡萄糖溶液。术后进行大体观察,对比各组大鼠的生理活动、精神状态、皮瓣的颜色、肿胀度等;同时采用ELISA法分别检测术后即刻、第三天、第七天缺血皮瓣中IL-6和VEGF的含量;最后在术后第十五天时,将皮瓣全层取下采用HE染色,观察组织层面的皮瓣愈合过程中血管形成的情况。(3)为了探究SVF对于短期高糖饮食下的缺血皮瓣愈合过程中血管形成的影响,我们随机将12只SD大鼠分成4组,分别为:空白组、模型组、高糖组、高糖实验组,(以高糖饮食单日含量为9g Glu为例),空白组和模型组都采取术后普通饲料自由取食,而高糖组和高糖实验组术后在普通饲料喂养的基础上,额外予以灌胃3g Glu Tid的高糖饮食;术后进行大体观察,对比各组大鼠的生理活动、精神状态、皮瓣的颜色、肿胀度等;同时采用ELISA法分别检测术后即刻、第三天、第七天缺血皮瓣中IL-6和VEGF的含量;最后在术后第十五天时,将皮瓣全层取下采用HE染色,观察组织层面的皮瓣愈合过程中血管形成的情况;同时进行CD31免疫组化,对比MVD的数值。结果:1.分别对比实验组与模型组及模型组与空白组,肉眼观察可以发现实验组的皮瓣愈合过程中血管形成情况优于模型组,而模型组较空白组可以发现皮瓣血管形成情况较差,同时还出现了皮瓣的延迟愈合;IL-6的结果:可以发现皮瓣愈合过程中模型组相比空白组各阶段均产生较多的IL-6(P<0.05);实验组各阶段相比模型组产生的IL-6更少(P<0.05);VEGF的结果:模型组相比空白组产生的VEGF更少(P<0.05);实验组对比模型组,产生了更多的VEGF(P<0.05);术后十五天缺血皮瓣全层HE染色结果显示:实验组皮瓣相比空白组,中性粒细胞明显减少,炎症反应轻。2.对于不同含量的高糖饮食,分别将实验I、II、III组与模型组两两对比,肉眼观察发现,术后予以高糖饮食的各组大鼠,缺血皮瓣的愈合过程中出现了不同程度的延迟及不愈合的情况;VEGF结果显示:实验I、II、III组分别与模型组比较,这三组的VEGF含量均低于组模型组(P<0.05,P<0.01,P<0.01);IL-6结果显示:实验I、II、III组分别与模型组比较,三组的IL-6含量均高于组模型组(P<0.05,P<0.01,P<0.01);模型组相比空白组产生较多的IL-6(P<0.05);术后十五天缺血皮瓣全层HE染色结果显示:实验I、II、III组分别与模型组对比,发现都出现不同程度的炎症细胞聚集,皮肤表面不完整及内部组织结构紊乱等。3.以单日高糖饮食9g Glu为例,分别将高糖实验组与高糖组对比,高糖组与模型组对比,肉眼观可以发现:高糖实验组的缺血皮瓣较高糖组,愈合情况稍好;IL-6结果显示:高糖实验组比高糖组IL-6明显减少(P<0.05);VEGF结果显示:高糖实验组比高糖组VEGF的含量有所增加(P<0.05);CD31免疫组化MVD结果显示:模型组较空白组MVD明显减少(P<0.05),高糖组较空白组MVD减少的更明显(P<0.05)。经过两两比较,空白组与高糖组与空白组之间MVD水平有差别(调整后P=0.035)。空白组与高糖实验组之间MVD水平有差别(调整后P<0.001)。其余各组之间MVD水平无差别(调整后P=0.054);术后十五天缺血皮瓣全层HE染色结果显示:高糖实验组较高糖组产生更多的成纤维细胞。结论:1.SVF通过抑制炎症反应,降低IL-6的含量和促进VEGF生成,增加缺血皮瓣的血管形成;2.术后短期高糖饮食会加重缺血皮瓣的炎症反应,不利于缺血皮瓣的血管形成;3.SVF对于短期高糖饮食下的缺血皮瓣,也有会增加其愈合过程中的血管形成。