论文部分内容阅读
研究背景与目的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)已成为全球最常见的肝脏恶性肿瘤,发病率在近几十年里呈明显上升趋势。随着免疫治疗的兴起,以PD-L1为免疫检查点的肿瘤免疫治疗在肝癌治疗中取得重大成就,但目前对于抗PD-L1免疫治疗疗效预测指标仍存在争议,但大多数研究皆表明PD-L1的表达是最重要的因素之一。PD-L1在rs17718883,rs4143185 and rs2890658的单核苷酸多态性以及血清PD-L1在之前的多个肿瘤和杂志进行过相关报道,然而很少有关于肝癌方面的报道。因此本研究旨在研究PD-L1单核苷酸多态性和血清PD-L1表达在肝癌诊断及预后之间的关系。方法:本课题分为两个部分。第一部分264例人的血清样本(原发性肝癌患者123例,健康对照人群141例)的PD-L1基因在rs4143185,rs2890658和rs17718883三个位点的单核苷酸多态性。观察这三个位点多态性与肝癌易感性,预后的关系。第二部分,我们收集整理2010年2月至2011年1月期间肿瘤中心确诊的160例HCC患者的血清与160例健康成人血清做对照。采用ELISA方法研究了循环PD-L1与肝癌发生的关系。我们收集了关于研究对象的有关临床资料包括病理诊断以及临床病例资料。患者在抽血前未经放化疗。本课题经第三军医大学附属三院伦理委员会审查通过。关于数据我们用EXCEL记录并用SPSS 19.0统计和Prism 6.0分析。结果第一部分研究显示PD-L1的rs2890658位点的突变基因(AC)与肝癌的发病风险呈负相关OR=0.43;95%CI:0.20-0.94;P=0.035,rs17718883的CG杂合突变基因型也可以降低发病风险,其余的基因型与肝癌的易感性之间无相关性;(P>0.05).rs2890658位点合并突变基因型AC与CC后,我们发现AC+CC和AA的中位生存时间为:20m vs.17m;P=0.042,有统计学差异;而PD-L1的rs4143185位点的CC,GC和GG三个基因型的中位生存时间为:15m,21m和18m,P=0.000,有统计学差异,rs4143185该位点的突变基因型都可以获得好的预后,HR<1;且P<0.05,差异有统计学意义。第二部分:在肝癌患者中,检测了血清PD-L1水平,发现了血清PD-L1(≥0.67ng/ml)是肝癌的危险因素;血清PD-L1蛋白诊断HCC的灵敏度为77.4%,特异性为60.6%,准确度为60.63%;具有一定诊断价值。血清PD-L1与AFP蛋白表达水平正相关。阐明了循环PD-L1可作为肝癌诊断标志物用于以后的肝癌诊断中。第一部分的主要结论为:1.PD-L1位点rs2890658(AC突变型)可能降低肝癌发病风险,2.PD-L1 rs4143185纯合突变型(GG)可能会增加肝癌的患病风险,3.rs4143185和rs2890658位点的的突变型基因往往提示经PD-L1治疗能获得更好的预后,因此,对于其基因型的检查对肝癌患者的免疫治疗有重要的意义。第二部分的主要结论为:1.血清PD-L1水平低于与正常对照人群水平,但是血清PD-L1(≥0.67ng/ml)是肝癌的危险因素。2.血清PD-L1蛋白诊断HCC的灵敏度为77.4%,特异性为60.6%,准确度为60.63%。具有一定诊断价值。3.血清PD-L1与AFP蛋白表达水平正相关,sPD-L1有可能作为肝癌诊断标志物应用到以后的肝癌诊断中。