【摘 要】
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随着传统大环内酯类驱虫抗生素在兽医临床上的广泛应用,虫体耐药性相继出现,给临床寄生虫病防治带来一定困难。莫西菌素（Moxidectin）为新一代大环内脂类驱虫药,能高效杀灭体内线虫和体表寄生虫,且药效持久。本试验旨在通过建立莫西菌素在鸡血浆和组织（肌肉、肝脏、肾脏、皮脂）中含量的检测方法,分析莫西菌素在鸡体内的药代动力学及残留消除规律,并参考最大残留限量标准确定莫西菌素在鸡组织中的休药期。为今后莫
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随着传统大环内酯类驱虫抗生素在兽医临床上的广泛应用,虫体耐药性相继出现,给临床寄生虫病防治带来一定困难。莫西菌素（Moxidectin）为新一代大环内脂类驱虫药,能高效杀灭体内线虫和体表寄生虫,且药效持久。本试验旨在通过建立莫西菌素在鸡血浆和组织（肌肉、肝脏、肾脏、皮脂）中含量的检测方法,分析莫西菌素在鸡体内的药代动力学及残留消除规律,并参考最大残留限量标准确定莫西菌素在鸡组织中的休药期。为今后莫西菌素在家禽寄生虫防治应用提供理论依据。具体研究内容如下:1.莫西菌素在鸡血浆和组织中HPLC-MS/MS检测方法的建立为了研究莫西菌素在鸡体内的药代动力学和残留消除规律,建立莫西菌素在鸡血浆和组织中高效液相色谱串联质谱检测方法（HPLC-MS/MS）。鸡血浆经乙腈提取,涡旋、离心后取上清液在氮气流下吹干,用乙腈复溶、0.22μm滤膜过滤,待上机检测。鸡肌肉、肝脏、肾脏经2%氨化乙腈提取,涡旋、离心取上清液后经正己烷去脂,并在氮气流下吹干,用乙腈复溶、0.22μm滤膜过滤,待上机检测。鸡皮脂经乙酸乙酯-乙腈（1:9,v/v）提取,涡旋、离心取上清液过Prime HLB柱净化去脂,收集所有洗脱液在氮气流下吹干,用乙腈复溶、0.22μm滤膜过滤,待上机检测。HPLC-MS/MS检测色谱条件为:色谱柱为Agilent RRHD Eclipse Plus C18柱（2.1×50mm,1.8μm）;流动相A为0.1%甲酸水,B为纯乙腈,经梯度洗脱程序检测。结果显示,在血浆和组织中,莫西菌素在1～200 ng/m L（ng/g）范围内线性关系良好（R~2＞0.998）,血浆中的LOD为0.2 ng/m L,组织中LOD为0.3 ng/g;血浆中的LOQ为1.0 ng/m L,组织中LOQ为1.0 ng/g。血浆和组织中莫西菌素的回收率在91.83%～108.33%之间,血浆、组织质控样品的日内、日间精密度RSD均小于4.10%,稳定性变异系数CV不超过6.53%。研究表明,建立的检测方法符合药代动力学和药物残留消除规律的试验方法学要求。2.莫西菌素浇泼剂在鸡体内药代动力学研究随机挑选了20只体重为2.0±0.5 kg的公鸡,分成两组,分别按照0.2 mg/kg B.W.背部浇泼莫西菌素浇泼剂或口服莫西菌素口服液。在给药后15、30 min、1、2、4、8、12、24 h内采集血液,经3000 r/min离心5 min后,获得的血浆样品置于-18℃保存。样品经建立的HPLC-MS/MS检测后,获得了血浆样品中莫西菌素的浓度,通过药代动力学软件分析两种给药方式的药代动力学参数。结果显示,莫西菌素口服给药组的Cmax为13.09±1.55 ng/mL,浇泼给药组的Cmax为10.48±1.56 ng/m L,两者差异显著（p＜0.05）;口服组的AUC（66.38±13.50 h·ng/m L）比浇泼组的AUC（47.25±13.99 h·ng/m L）高,差异极显著（p＜0.01）;而口服组的CL（3176.93±905.87 m L/h/kg）则明显低于浇泼组的CL（6925.39±3542.47 m L/h/kg）,具有统计学意义（p＜0.01）。浇泼给药组和口服给药组的T1/2β、Tmax、Vd和MRT的差异不显著（p＞0.05）。莫西菌素口服给药在鸡体内的血药浓度要高于浇泼给药,药效更持久,且清除速率更低。3.莫西菌素浇泼剂在鸡体内的药物残留消除规律研究随机挑选了42只体重为2.0±0.5 kg的公鸡,按照0.2 mg/kg B.W.背部浇泼莫西菌素浇泼剂,在给药后第1、5、10、20、25、30、35 d分别采集5 g肌肉、肝脏、肾脏、皮脂并置于-18℃保存,样品解冻后经处理,用HPLC-MS/MS方法检测莫西菌素残留量,根据规定按照残留量的95%置信区间上限低于最高残留限量的时间确定休药期,最终确定肌肉、肝脏、肾脏、皮脂的休药期分别为2.6 d、12.2 d、1.6 d和2.4 d,建议莫西菌素浇泼剂施用于鸡体后的休药期为13 d。
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