【摘 要】
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目的 探讨硫氧还蛋白(Trx)反义寡核苷酸对前列腺癌PC3细胞生物学特性的影响。 方法 设计、合成针对Trx基因活性位点的反义寡核苷酸(Trx-ASON),不同浓度(0.5μM、1.0μM、2
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目的 探讨硫氧还蛋白(Trx)反义寡核苷酸对前列腺癌PC3细胞生物学特性的影响。 方法 设计、合成针对Trx基因活性位点的反义寡核苷酸(Trx-ASON),不同浓度(0.5μM、1.0μM、2.0μM)的Trx-ASON在脂质体介导下转染前列腺癌PC3细胞,对照组转染硫氧还蛋白正义寡核苷酸(终浓度为1.0μmol/L),另设一正常空白对照。采用MTT比色法检测细胞增殖活性;激光扫描共聚焦显微镜观察形态学变化、细胞DNA凝胶电泳法和流式细胞仪检测细胞凋亡。 结果 MTT法显示硫氧还蛋白反义寡核苷酸对PC3细胞的增殖有明显的抑制作用,同一组内各时间点的抑制率差别不大,经统计学处理分析差异无显著性。对同一时间点各组间的抑制率比较,浓度越高,抑制率越高,经统计学处理分析差异有显著性(P<0.05);激光扫描共聚焦显微镜显示ASON转染组部分癌细胞体积缩小、核固缩、染色质聚集成块位于核周边,细胞间有核碎片,符合凋亡形态学改变;转染2.0μM硫氧还蛋白反义寡核苷酸组凝胶电泳出现梯形条带;流式细胞仪检测显示反义组凋亡率明显高于对照组,经统计学处理分析差异有显著性(P<0.05);且随着浓度增加,凋亡率亦增加。
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