三聚氰胺对犬肾损伤的试验研究

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三聚氰胺是一种应用广泛的工业原料,不能被食用,也不是食品添加剂。蓄意添加三聚氰胺到宠物及人类的食品中是非法行为,已经有过一系列宠物及人类三聚氰胺中毒事件的发生。大量研究已经表明三聚氰胺具有低毒性,长期大量摄入会造成泌尿器官的损害。本试验中通过饲喂犬一定时间和剂量的三聚氰胺,在饲喂期间检测血常规、血清生化和超声影像,并在饲喂结束后检测肾组织骨桥蛋白(osteopontin, OPN)和丛生蛋白(clusterin,CLU)的基因表达量、抗氧化酶活性和肾组织结构,以观察三聚氰胺对犬肾的影响。本试验将8只试验犬随机分为两组,对照组3只,试验组5只,所有试验动物处在相同的饲养环境中。在试验前,所有试验动物进行超声影像、血常规及生化检查,以确保试验犬符合试验要求。试验开始后试验组按每天600mg/kg体重的三聚氰胺剂量饲喂犬,连续饲喂75 d,每隔6d采血、采尿一次。血液用于做血常规及生化检测,尿液用于观察尿沉渣。试验后期,所有试验动物进行超声影像学检查。最后通过手术摘取左侧肾,肾组织分别用于病理组织学观察、抗氧化酶活力测定和荧光定量PCR检测。试验结果如下:(1)饲喂三聚氰胺能够改变犬血液理化指标,白细胞总数及中性粒细胞总数轻微上升;在饲喂第62 d时犬的ALT、AST显著性升高(P<0.05);尿素氮和肌酐则在饲喂过程中持续升高;饲喂三聚氰胺后即可引起犬尿液中有大量白色沉淀产生,尿沉渣镜下观察发现尿液当中的三聚氰胺结晶呈多种形态;试验后期超声影像学显示肾出现结石。(2)饲喂75 d后,荧光定量PCR检查,与对照组相比,试验组肾皮质的OPN和CLU的基因表达量升高,但无显著差异(P>0.05),但髓质中OPN的基因表达量显著升高(P<0.05),CLU的基因表达量极显著升高(P<0.01)。(3)肾组织学观察结果显示:三聚氰胺不仅引起犬肾小管的损害,同时也对肾小球造成损害。部分肾小管极度扩张,有些肾小管萎缩;间质纤维组织增生。部分肾小球肿胀,肾小球内可见细胞增多;肾小囊狭窄甚至消失,肾小球毛细血管消失或内有血栓形成;有些肾小球毛细血管扩张,血浆蛋白渗出并浸润于毛细血管袢,许多肾小管内有蛋白管型。(4)饲喂75 d后,试验组肾髓质GSH-Px、SOD与对照组相比显著下降(P<0.05),MDA则显著上升(P<0.05)。综上可知,按每天600 mg/kg体重连续饲喂犬三聚氰胺75 d后,能使犬形成肾结石和尿沉渣,引起肾组织抗氧化能力下降,肾组织结构破坏,对肾功能造成严重损害。
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