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目的:研究Rett综合征(Rettsyndrome,RTT)家系的Mecp2(methyl-CpGbindingproteingene)基因突变,探讨X染色体失活(Xchromosomeinactivation,XCI)在RTT致病机制中的作用,分析Mecp2基因型与表现型的关系。
方法:采集佳木斯地区1个Rett综合征家系成员的血样2~3ml(EDTA抗凝),应用chelex-100提取DNA,聚合酶链式反应扩增RTT致病基因Mecp2的3个外显子和3’UTR(3’端非翻译区),琼脂糖凝胶电泳和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离目的片段,PCR产物经纯化后直接测序;应用甲基化PCR(methylationspecificPCR,MSP)进行XCI分析。
结果:患儿Mecp2基因的Exon3发生3个点突变(分别为C639T、G1152C、G1156T)和1个插入突变1255insT。家系成员中母亲发现1个插入突变768insT;父亲发现1个插入突变和1个点突变C772T;奶奶发现2个点突变G1286T和C1313T。C639T、G1152C、G1156T和1255insT为首次报告。突变为新生突变。此外,患儿与患儿母亲表现为非随机XCI,X染色体非随机失活在RTT的致病机制中发挥作用。
结论:Rett家系中存在Mecp2基因突变;所发现的突变均位于Exon3;X染色体非随机失活在RTT的致病机制中发挥作用。未发现Mecp2基因型与表现型之间有确定的关系。