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背景与目的:肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,该疾病发病率的趋势逐年增高,手术切除仍然是治疗肝癌最有效的方法。许多基因的参与与肝癌的发生发展及转归有着密切的关联,在肝癌的不同发展时期均有基因的参与及调控。RNA干扰(RNA interference, RNAi)是存在于真核生物体内的一种阻断外源基因表达的自我防御体系。由双链RNA介导,能够特异性的使细胞内与其互补的单链RNA发生降解。近年来,国内外报道了一系列通过RNAi特异性抑制肝癌发病相关基因的实验,为肝癌研究及靶向治疗带来新希望和新启示。Livin又称KIAP (kidney inhibitor of apoptosis protein)、ML-IAP (melanoma inhibitor of apoptosis protein),是新近发现的凋亡抑制蛋白家族(IAPs)中的新成员,最近研究表明,Livin基因在多种肿瘤细胞中高表达,参与肿瘤的发生发展。本研究通过RNA干扰技术抑制肝癌细胞株HepG2中Livin基因的表达,观察Livin基因对肝癌细胞HepG2的增殖、凋亡以及细胞周期的影响,并探讨其相关作用机制,为以Livin基因为靶点肝癌的基因治疗提供实验依据。方法:将携带Livin基因的siRNA载体转染至HepG2细胞内,应用RT-PCR、 Western blot技术检测转染前后Livin基因]nRNA和蛋白质的表达改变。流式细胞技术(FCM)和TUNEL检测转染前后肝癌细胞周期与凋亡的变化。采用SPSS15.0统计学软件进行统计学实验结果分析,以x±s来表示实验中计量资料测定结果,采用统计学分析方法中的方差分析以及t检验,P≤0.05为差异有统计学意义的标准。结果:1.肝癌HepG2细胞中livin基因处于高表达状态,其对细胞凋亡有明显的抑制作用。2.转染携带livin基因的siRNA后,RT-PCR结果显示,livin基因的mRNA表达水平明显下降,相对于对照组与空白组有统计学意义。3.转染携带livin基因的siRNA后,Western blot检测结果显示,livin基因的蛋白质表达水平明显下降,相对于对照组与空白组有统计学意义。4.转染携带livin基因的siRNA后,FCM检测发现实验组与阴性对照组和空白组肝癌细胞HepG2在G1期所占比例及细胞早期凋亡率的差异均有统计学意义。5.转染携带livin基因的siRNA后,TUNEL技术检测表明实验组肝癌细胞HepG2凋亡数目明显增加,细胞凋亡率明显高于其他两组。结论:1. Livin基因在肝癌细胞中高表达,参与肝癌的发生发展。2. Livin-siRNA可以下调肝癌HepG2细胞中Livin基因mRNA和蛋白的表达。3.在肝癌细胞HepG2中siRNA沉默Livin基因具有诱导肝癌细胞凋亡,抑制肝癌细胞生长的作用。