富血小板血浆对大鼠巨噬细胞表型的影响及其机制的初步研究

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目的:观察同种异体富血小板血浆(Platelet-Rich Plasma, PRP)对大鼠腹腔原代巨噬细胞表型的影响并初步研究其机制。为进一步探讨PRP对糖尿病足等慢性创面的治疗作用机制,提供实验依据。方法:以健康大鼠腹腔巨噬细胞作为观察对象。从大鼠血液中提取PRP,对巨噬细胞进行体外培养。本实验分为两组:将培养基中含20%浓度PRP的作为实验组,以DMEM培养基常规培养的作为空白对照组。在分组培养24h后,以流式细胞仪检测M1、M2型巨噬细胞表面标记分子CCR7、CD163的阳性率,并对结果进行统计学处理。同时检测培养上清液中炎症因子IL-12、IL-10、IL-4的浓度,并分析各组间差异。最后以蛋白印迹(Western Blot)方法检测两组细胞信号传导和转录因子STAT1和STAT6的磷酸化水平,观察PRP对其磷酸化的影响。结果:在培养24h后,实验组中CD163阳性率明显升高,具有统计学意义(P<0.01),而CCR7阳性率未发生显著变化(P>0.05)。实验组上清液中IL-12浓度略高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组中IL-4、IL-10浓度明显高于对照组(P<0.01)。Western Blot结果显示,实验组和对照组STAT1都未发生明显磷酸化,而实验组中STAT6磷酸化水平明显增高。结论:PRP能明显促进大鼠巨噬细胞转化为M2型巨噬细胞。其作用机制与JAK1/3-STAT6通路有关。
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