目的:Foxp3转录因子在大脑中枢神经的传递过程中发挥着极其关键的功能。Foxp3转录因子不仅可以结合其他类的神经性递质同时参与大脑中枢神经系统的相关物质的神经传递效应,除此之外,Foxp3转录因子还在行为活动,人体的情绪变化甚至机体的食欲调节等各个方面起到至关重要的作用。总之,在机体内部,无论是Foxp3转录因子的合成,还是该物质在体内的释放,或者转运以及再摄取等所有环节的每一个环节出现异常均会会表现出神经系统异常的症状。最近十年,基础研究也越来越深入机体的调节性T细胞的含量与肿瘤、神经外伤性疾病以及自身免疫性疾病的发生的相关性研究。特别是关于CD4+CD25+调节性T细胞和Foxp3转录因子的含量变化与相关疾病的关系成为近几年研究的热点和难点问题。有关脑组织受损程度与CD4+CD25+调节性T细胞的含量和Foxp3转录因子的表达之间的关系的相关系统研究还不是很多,特别是有关的基础性动物实验研究的更少,关于脑组织受损后,动物体内血清中CD4+CD25+调节性T细胞和Foxp3转录因子的表达变化与发病的机制及进程目前还不是很清楚。为确定脑损伤大鼠和正常大鼠的神经功能缺损详细评分(Neurological Severity Scores,NSS)与体内CD4+CD25+调节性T细胞和Foxp3水平之间的相关性,我们利用一个大鼠脑损伤模型测定NSS评分,外周血CD4+CD25+T细胞数量以及脑组织Foxp3表达,分析脑损伤进程对于上述各参数的影响并最终确定他们之间的相关性。该研究可为今后针对脑组织受损而引起的相关症状的治疗提供一定的科学支撑。方法:1实验方法:实验随机分为两大组,每组20只大鼠。根据Zea-Longer插线方法的改良技术,造成大鼠右侧大脑中动脉缺血建立脑组织受损的动物模型。分别于实验第1、3、7、14天分别处死5只。通过不同组别不同时间点大鼠进行NSS评分,同时应用流式细胞术测定外周血中CD4+CD25+调节性T细胞以及免疫组化检测脑组织中Foxp3转录因子的表达,研究大鼠脑组织受损后外周血中CD4+CD25+调节性T细胞以及Foxp3转录因子表达的变化并确定其相关性。2统计学方法:本文所有数据均采用SPSSl8.0统计软件分析。计数资料的分析采用Fisher以及χ2检验。多组均值分析使用ANOVA方差分析。相关性分析采用Spearman分级相关性分析以及多元分布回归。设定检验水准α=0.05。结果:1实验组大鼠在脑组织受损侧的大脑的基底节区以及大脑皮层部出现白色脑组织梗死的迹象,而对照组大鼠脑组织未出现梗死的迹象,表明实验动物模型制备成功。2实验组和对照组两组大鼠的各个时间点的神经功能缺损评分差异存在有统计学差异(P<0.05)。对于实验组的大鼠,在脑组织受损后的不同时间点,其NSS评分也存在有差异性(P<0.05)。3实验组和对照组的大鼠出现的NSS量表评分的差异存在有统计学意义,实验组的大鼠NSS量表的得分明显高于对照组(P<0.05)。4在实验组和对照组大鼠两组模型制备成功后的第1天和第3天时,实验组大鼠与对照组大鼠的外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量差异不显著(P>0.05),然而,在第7天和第14天时,实验组大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的含量显著高于对照组(P<0.05)。5实验组大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量在不同的时间点,存在有显著性差异(P<0.05),对照组大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量在不同的时间点差异没有统计学意义(P>0.05)。6实验组大鼠的脑组织中可见有梗死病灶,脑组织受损的区域呈现出典型的缺血性病理改变,周围正常脑组织与病变部位组织之间的界线非常清楚,通过进一步观察可以发现:脑组织受损的部位坏死范围内,可见有大量的脑神经细胞因缺血而出现不同程度的坏死,其中绝大多数脑神经细胞的结构已经消失,并且难以辨认脑组织部位的神经元外形,脑组织受损部位的神经细胞数目出现不同程度的减少,脑神经细胞的胞浆呈现出空泡样的变性。7在实验组的动物模型制作成功后的第1天、第3天、第7天和第14天时均可以检测到脑组织的受损部位有Foxp3的表达,Foxp3分布的范围主要集中在脑组织受损的周边区域,虽然在正常的脑组织组织部位也出现Foxp3的表达,但只有较少的数量。在对照组在动物模型制作成功后的第1天、第3天、第7天、第14天脑组织中未见明显Foxp3的表达。8在动物模型制备成功后的第1天、第3天、第7天和第14天四个时间点,NSS评分与实验组大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的表达有负相关关系(P<0.05)。9将研究对象血液中CD4+CD25+调节性T细胞含量以及脑组织中Foxp3表达等因素作为自变量,而将大鼠NSS得分分值评分作为应变量,进行多元逐步回归分析,结果发现:MCD4+CD25+调节性T细胞、脑组织中Foxp3进入回归方程,表明CD4+CD25+调节性T细胞、脑组织中Foxp3对大鼠NSS得分分值有较大影响。结论:1大鼠脑组织受损后,血液中CD4+CD25+调节性T细胞的含量,在受损后的不同时期存在着动态变化,表明CD4+CD25+调节性T细胞参与大鼠脑组织受损后病理生理发生以及发展过程。2大鼠脑组织受损部位Foxp3的表达与脑组织受损的形成具有密切的关联性,Foxp3的表达主要集中在受损的病灶以及周边区域;3大鼠脑组织受损后,局部脑组织的神经元胞体可出现缩小,胞核深染、固缩,以及神经细胞出现大量缺血坏死的现象;伴有大部分细胞结构消失,神经元外形不易辨认,胞浆空泡样变性,以及受损灶内大量胶质细胞增生等病理改变。4大鼠脑组织受损后血液中CD4+CD25+调节性T细胞的表达与神经功能损伤程度呈负相关,提示CD4+CD25+调节性T细胞在急性脑缺血后的免疫调节中可能具有保护作用。