纳米豆粕在小鼠消化道内示踪研究

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本文以纳米豆粕为研究对象,主要研究内容包括纳米豆粕的制备及粒径表征;纳米豆粕在小鼠消化道各部分的分布情况的研究;纳米豆粕对小鼠消化道形态结构的影响。主要研究方法、结果与结论如下:1.采用球磨法将普通豆粕加工成纳米豆粕,通过扫描电子显微镜和激光粒度仪对纳米豆粕的形貌和粒径进行表征,结果表明:豆粕粒子粒径分布在200-300nm,单分散性良好。扫描电镜观察显示纳米豆粕粒子有的具有球形形貌特征,有的为椭圆形,还有的为不规则形状,其中球形和椭圆形所占比例较大,纳米豆粕粒子尺寸分布比较均匀。激光粒度仪分析结果显示:干磨法研磨获得的纳米豆粕最小粒径在200nm附近,粒径分布比较均匀,粒径分布峰值在219.8nm处。2.本论文利用β-伴大豆球蛋白的抗原性和相对稳定性,研究了纳米豆粕在小鼠消化道内的分布情况。本实验采用双抗夹心ELISA定量分析纳米豆粕在小鼠消化道的分布情况,并与普通豆粕进行对比。研究结果显示:纳米豆粕、普通豆粕在消化道中的分布无显著性差异,同时也表现出相同的分布规律:灌胃0.5h之后两种豆粕主要分布在胃部,1h之后主要分布在小肠。此外纳米豆粕、普通豆粕、荧光微球在小鼠消化道各部位的分布比例也呈现出类似的规律:0.5h大部分分布在胃和小肠,在大肠中分布很少。在1-3.5h后分布最多的部位在小肠的空肠、回肠部位,大肠中的分布很少。通过对普通豆粕组和纳米豆粕组分布的显著性分析发现:在胃、十二指肠、空肠、回肠、直肠这些部位纳米豆粕的分布比例和普通豆粕无显著性差异(P<0.05),而在结肠部位纳米豆粕组高于普通豆粕组(P>0.05)。灌胃后在0.5h、1h、2h、3.5h,检测到消化道内的纳米豆粕占到灌胃总量的百分比分别为16.8%、23.4%、24.9%、24.6%,而普通豆粕占到灌胃总量的百分比分别为17.1%、23.6%、24.8%、24.9%。同样的时间段,消化道内的荧光占到灌胃总量的百分比分别为19.3%、29.7%、32.5%、33.3%。3.普通豆粕组和纳米豆粕组小鼠的消化道制作石蜡切片HE染色,结果表明给小鼠灌胃纳米豆粕3.5h后纳米豆粕组和普通豆粕组小鼠消化道形态结构相似。之后又做了免疫组化胶体金染色,结果发现:纳米豆粕在消化道中主要存在于小肠皱襞柱状细胞和大肠的细胞质中,个别出现在胃的黏膜层,局部的胶体金出现了聚集现象。
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