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目的:1临床研究:研究CVA患者中医证候要素分布规律。2动物实验:基于Th1/Th2细胞免疫失衡机制,通过动物实验探究慢咳方对CVA模型大鼠IFN-γ、IL-4等炎症因子,大鼠肺组织GATA-3、T-betm RNA及其蛋白表达的影响,为慢咳方临床应用提供理论依据。方法:1临床研究:查阅文献,制定出CVA中医证候学信息调查表,对96例CVA患者的一般信息、临床症状等资料进行统计学分析,总结出CVA患者中医证候要素的分布规律。2动物实验:将实验大鼠随机分成空白组、模型组、慢咳方低、中、高剂量组、孟鲁司特钠组,除空白组外,其余5组以卵清蛋白(OVA)致敏和雾化激发的方式构建CVA模型,造模成功后,治疗组分别以相应剂量的中药及孟鲁司特钠进行灌胃,给药14天后留取标本,通过HE染色法对大鼠肺组织进行病理学观察;ELISA法检测大鼠血清IFN-γ、IL-4等炎症因子水平;q RT-PCR法检测CVA大鼠肺组织GATA-3、T-betm RNA表达水平;Western blot法检测大鼠肺组织GATA-3、T-bet蛋白表达水平。结果:1临床研究:96例CVA患者中医证候学调查结果显示,最常见的证型为风盛挛急证(占38.54%),其次为风寒束肺证(占15.63%)、痰湿蕴肺证(占11.46%)、肺脾气虚证(占9.38%)等。2实验研究2.1病理学改变与空白对照组相比,模型组大鼠支气管及肺泡等肺组织结构破坏明显,可见上皮细胞脱落、增生,支气管、血管、肺泡等周围可见较多炎性细胞浸润。与模型组相比,慢咳方各剂量组及孟鲁司特钠组肺组织结构破坏、炎性细胞浸润等病理表现均有不同程度减轻,尤以慢咳方高剂量组及孟鲁司特钠组减轻明显。2.2血清IFN-γ、Ig E、IL-5、IL-13、IL-4水平ELISA法检测大鼠血清IFN-γ水平,结果显示:与空白对照组相比,模型组血清中IFN-γ水平明显降低(P<0.01)。与模型组相比,慢咳方中、高剂量组血清中IFN-γ水平明显升高(P<0.05),与孟鲁司特钠组相比,慢咳方高剂量组血清IFN-γ水平无统计学差异(P>0.05)。ELISA法检测大鼠血清Ig E、IL-4、IL-5、IL-13水平,结果显示:与空白对照组相比,模型组、慢咳方低、中剂量组血清中Ig E、IL-4、IL-5、IL-13水平明显升高(P<0.01)。与模型组相比,其余各组血清中Ig E、IL-4水平均明显下降(P<0.05),慢咳方中、高剂量组及孟鲁司特钠组IL-5、IL-13水平明显下降(P<0.05),与孟鲁司特钠组相比,慢咳方高剂量组血清Ig E、IL-4、IL-5、IL-13水平无统计学差异(P>0.05)。2.3 GATA-3、T-betm RNA表达与空白对照组相比,余各组大鼠肺组织中GATA-3m RNA表达均明显升高(P<0.01),T-betm RNA的表达均明显下降(P<0.01)。与模型组相比,慢咳方各剂量组及孟鲁司特钠组大鼠肺组织中GATA-3m RNA表达均明显降低(P<0.01),T-betm RNA在慢咳方中、高剂量组及孟鲁司特钠组中表达均明显升高(P<0.01),孟鲁司特钠组与慢咳方高剂量组相比,GATA-3、T-betm RNA的表达水平无统计学差异(P>0.05)。2.4 GATA-3、T-bet蛋白表达与空白对照组相比,余各组大鼠肺组织中GATA-3蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),T-bet蛋白表达水平均明显下降(P<0.01)。与模型组相比,GATA-3蛋白在余各剂量组及孟鲁司特钠组中的表达水平均明显下降(P<0.01),T-bet蛋白在慢咳方中、高剂量组及孟鲁司特钠组中的表达水平明显升高(P<0.01),T-bet蛋白在慢咳方高剂量组中升高尤为明显,高剂量组及孟鲁司特钠组中GATA-3蛋白表达水平无统计学差异(P>0.05)。结论1中医证候学调查显示,CVA患者最常见的证型为风盛挛急证,其次为风寒束肺证、痰湿蕴肺证、肺脾气虚证等。张念志教授基于“风-痰-虚”之理论,在中药使用上,以祛风散邪,化痰止咳,补虚固本为原则,结合多年临证实践经验,创制“慢咳方”,通过合理的临证加减,可用于CVA常见证型的治疗。2实验研究显示,慢咳方能够有效改善CVA模型大鼠临床症状及肺组织病理形态变化,通过提高IFN-γ的水平,降低血清中Ig E、IL-5、IL-13、IL-4等炎症因子水平,抑制GATA-3m RNA及其蛋白的表达,提高T-betm RNA及其蛋白的表达水平,从而调节Th1/Th2细胞免疫失衡,减轻气道炎症及支气管黏膜炎性损伤,达到治疗CVA的目的。