【摘 要】
：
[目 的]本研究通过高脂高胆固醇致石饲料饲养C57BL/6小鼠建立小鼠胆结石模型,研究阿司匹林预防C57BL/6小鼠胆结石形成作用,阐明其可能的作用机制,以期为胆结石的预防和治疗提供实验依据。[方法]选取24只6-8周雄性SPF级C57BL/6小鼠适应性喂养一周,一周后进行分笼、编号,并随机分成对照组（n=6）、模型组（n=6）、熊去氧胆酸组（n=6）、阿司匹林组（n=6）4个组。熊去氧胆酸组每天
【基金项目】
：
云南省卫生健康委员会医学后备人才培养计划（H-2018065）； 基于腹腔镜技术治疗门静脉高压静脉曲张再出血多中心研究（2020yn1c004）；
论文部分内容阅读
[目 的]本研究通过高脂高胆固醇致石饲料饲养C57BL/6小鼠建立小鼠胆结石模型,研究阿司匹林预防C57BL/6小鼠胆结石形成作用,阐明其可能的作用机制,以期为胆结石的预防和治疗提供实验依据。[方法]选取24只6-8周雄性SPF级C57BL/6小鼠适应性喂养一周,一周后进行分笼、编号,并随机分成对照组（n=6）、模型组（n=6）、熊去氧胆酸组（n=6）、阿司匹林组（n=6）4个组。熊去氧胆酸组每天喂高脂高胆固醇致石饲料,并按130mg/kg/d熊去氧胆酸灌胃;阿司匹林组每天喂高脂高胆固醇致石饲料,并按100mg/kg/d阿司匹林灌胃;对照组每天喂基础饲料,并灌胃等体积的蒸馏水/d;模型组每天喂高脂高胆固醇致石饲料,并灌胃等体积的蒸馏水/d。喂养至8周,肉眼观察小鼠胆囊内及肝外胆管内有泥沙样或颗粒状沉积物即可判定为胆结石;采集小鼠胆汁用荧光酶标定量测定胆汁中性粒细胞胞外网络（NETs）量,测定胆汁中胆固醇（TC）及胆汁酸（TBA）含量;采集小鼠血清测定小鼠血胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）含量;取小鼠肝脏用Q-PCR法测定肝脏组织CYP7a1与HMG-COA还原酶mRNA水平表达量;运用组织病理学方法观察小鼠肝脏组织病理改变。[结 果]1.饲养期间小鼠均精神状态及食欲较好,毛发光亮、身体灵活、反应敏捷、生长状况良好、无不良反应;8周后模型组、熊去氧胆酸组、阿司匹林组小鼠体重均无统计学差异,但对照组的体重高于高脂高胆固醇致石饲料喂养的三个组且具有统计学意义（F=3.58,P=0.016）。2.模型组小鼠成石率100%,显著高于正常对照组;熊去氧胆酸组小鼠成石率33.33%,低于模型组;阿司匹林组小鼠成石率50.0%,低于模型组,且差异均有显著统计学意义（P＜0.001）。3.4组小鼠胆汁中中性粒细胞胞外网络（NETs）含量总体比较差异具有统计学意义（F=53.29,P＜0.001）;进一步进行组间比较,模型组小鼠胆汁中NETs含量高于对照组、熊去氧胆酸组、阿司匹林组小鼠胆汁中的含量,差异具有显著统计学意义（均P＜0.001）;熊去氧胆酸组、阿司匹林组小鼠胆汁中NETs含量差异无统计学意义（P=0.39）。模型组小鼠胆汁胆固醇（TC）含量高于对照组、熊去氧胆酸组及阿司匹林组的含量,差异具有统计学意义（均P＜0.05）;熊去氧胆酸组与阿司匹林组小鼠胆汁TC含量差异无统计学意义（P=0.41）。模型组小鼠胆汁中胆汁酸（TBA）含量低于对照组、熊去氧胆酸组及阿司匹林组的含量,差异具有统计学意义（均P＜0.05）;熊去氧胆酸组与阿司匹林组小鼠胆汁TBA含量差异无统计学意义（P=0.20）。4.4组小鼠血清中TC、TG、LDL-c、HDL-c含量总体比较差异具有显著统计学意义（F值分别为18.22、37.49、39.01、18.47,P值均＜0.001）;与模型组相比,对照组、熊去氧胆酸组、阿司匹林组小鼠血清中TC、TG、LDL-c含量均相对较低且差异具有统计学意义（均P＜0.05）;模型组小鼠血清中HDL-c含量低于对照组、熊去氧胆酸组、阿司匹林组的含量且具有统计学意义（均P＜0.05）;熊去氧胆酸组与阿司匹林组相比,小鼠血清中TC、TG、LDL-c、HDL-c含量差异均无统计学意义（P值分别为0.42、0.40、0.27、0.74均＞0.05）。5.4组小鼠肝脏CYP7a1、HMG-COA还原酶mRNA水平表达量差异具有显著统计学意义（F=260.08,P＜0.001;F=126.29,P＜0.001）,进一步进行组间比较发现与对照组相比,模型组小鼠CYP7a1mRNA水平表达量相对较低而HMG-COA还原酶mRNA水平表达量相对较高,且差异具有显著统计学意义（均P＜0.001）;与模型组相比,熊去氧胆酸组、阿司匹林组CYP7a1、HMG-COA还原酶mRNA水平表达量差异具有显著统计学意义（均P＜0.001）,小鼠CYP7a1mRNA水平表达量模型组相对较低,而HMG-COA还原酶mRNA水平表达量模型组相对较高。6.模型组小鼠肝脏增大明显,显微镜观察肝脏脂肪变性明显,有不同程度的炎性细胞浸润,甚至出现大量肝细胞点状坏死、碎片状坏死和胆汁淤积等;熊去氧胆酸组、阿司匹林组肝脏组织病变较模型组轻微。[结 论]1.高脂高胆固醇致石饲料饲养C57BL/6小鼠的致石方法能成功建立胆结石模型,该方法简单且致石率高。2.阿司匹林可通过调节C57BL/6小鼠血清中TC、TG、LDL-c、HDL-c含量;调节肝脏CYP7a1、HMG-COA还原酶等胆固醇代谢限速酶,进而影响胆汁中TC、TBA及磷脂的比例,进而抗C57BL/6小鼠胆结石形成。3.阿司匹林可能是通过抗氧化应激减少C57BL/6小鼠产生ROS,改善肝脏炎性病变,进而减少胆汁中NETs含量,干扰胆固醇结晶等沉淀聚集增大过程,从而抗胆结石的形成和增大。
其他文献
[目 的]本研究旨在分析RPS15A基因在前列腺癌细胞DU-145、PC3、LNCAP三株细胞中的表达;研究RPS15A基因在裸鼠皮下移植瘤生长中的作用;揭示RPS15A基因对前列腺癌细胞周期的影响及作用机制;并初步探讨RPS15A抑制前列腺癌细胞凋亡的相关分子机制。有助于进一步了解RPS15A在前列腺癌发生发展中的作用。[方法]1.RT-qPCR检测RPS15A在前列腺癌细胞DU-145、PC3
[目 的]通过体外细胞功能实验和动物体内实验,探究美迪紫檀素和Griffipavixanthone在体内外对膀胱癌细胞的抑制作用,并通过机制研究,初步探究美迪紫檀素和Griffipavixanthone抑制膀胱癌细胞的具体机制,为美迪紫檀素和Griffipavixanthone作为新型抗肿瘤药物用于临床提供理论依据。[方 法]使用不同浓度的美迪紫檀素分别处理膀胱癌细胞T24和EJ细胞系24小时和4
[目 的]初步研究双氢青蒿素联合顺铂对膀胱癌细胞（T24/5637）周期、凋亡、侵袭和迁移能力的影响,探讨双氢青蒿素是否能增强顺铂对膀胱癌细胞的化疗敏感性。该研究能为膀胱癌化疗方案的理论研究提供新的思路,同时为临床上膀胱癌化疗方案的选择提供新的理论依据。[方 法]1.通过CCK8检测细胞增殖活性,细胞活力=（实验孔OD-空白组OD）/（对照组OD-空白组OD）%。设置DDP、DHA的浓度梯度,根据
第一部分 PC12细胞氧糖剥夺再灌注模型的建立及对炎症反应的影响[目 的]观察大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞）氧糖剥夺（OGD）不同时间段再灌注后细胞形态学及炎症因子表达的变化,探讨PC12细胞氧糖剥夺再灌注（OGD/R）模型的建立对炎症反应的影响,为后续PC12细胞OGD/R诱导神经细胞损伤模型的建立奠定基础。[方 法]将PC12细胞用无糖无血清DMEM培养基培养于37℃含94%N2
肝硬化是影响全世界人民健康的重大公共卫生问题,全球约8.44亿人患有慢性肝病,导致每年约有200万人死亡。而肝纤维化是终末期肝病的常见病理过程,可进展为肝硬化、肝功能衰竭、肝细胞癌等。因此我们应尽可能在疾病发生发展的早期就进行干预。近年来在一些动物模型上发现肝纤维化早期在去除致病因素后可以逆转,这就为我们的研究提供了新的方向,具有很大的研究意义和临床价值。肝纤维化的起始和进展过程都伴有炎性细胞的募
[目 的]探究肥大细胞膜稳定剂富马酸酮替芬（KFA）对肾草酸钙结石形成的抑制作用及可能的分子机制。[方法]40只雄性Sprague Dawley（SD）大鼠随机分为对照组（Control）、模型组（Model）、富马酸酮替芬（KFA）组,各组分别为10只、15只、15只。Model和KFA两组饮用1%乙二醇液共6周,以诱导草酸钙（CaOx）结石形成,Control组饮用生活用水。KFA组每天皮下注
[目的]探讨干预成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）表达对肝内胆管细胞癌细胞生物学行为的影响及其分子生物学机制。[方法]体外培养RBE、HUCCT1、HCCC9810等3株肝内胆管癌细胞（Intrahepatic Cholangiocarcinoma,ICC）,用 Western Blot 对三株细胞中 FGFR3的表达量进行比较,选择表达量最高的RBE细胞进行后续实验。使用siRNA技术抑制R
第一部分 γ-羟基丁酸成瘾与海洛因依赖冲动性和认知功能的比较研究[目 的]本研究旨在通过比较γ-羟基丁酸（Gamma-hydroxybutyrate,GHB）成瘾者与海洛因依赖者的冲动性、负性情绪、渴求、认知功能及P300成分等,来了解新型合成毒品（GHB）使用者与传统毒品（海洛因）使用者的人格特征,及不同毒品使用对成瘾者情绪和认知功能的影响。从而为其预防和治疗提供依据。[方 法]本横断面研究收集
[目 的]采用第二代高通量测序技术,通过对胆囊结石患者胆囊组织中差异表达lncRNA和mRNA表达谱的检测及生物信息学分析,初步了解lncRNA和mRNA在胆囊结石病发生发展中可能发挥的生物学功能及作用通路,并对测序结果进行初步验证。[方 法]1、经昆明医科大学第二附属医院伦理委员会批准,于2021年3月-2021年7月期间收集了昆明医科大学第二附属医院普外科4例胆囊结石患者的上皮组织作为结石组样
肝纤维化（Hepatic fibrosis,HF）是肝硬化的前期病变阶段,在2017年全球疾病负担研究报告称,代偿性肝硬化的流行病例有1.12亿例,可以看出肝硬化是威胁人类健康的重要疾病。HF是各种急慢性肝损伤因素引起的以炎症反应和细胞外基质（Extracellularmatrix,ECM）在肝脏中过度累积为主要损伤修复特点的病理过程,其中急慢性肝损伤因素包括病毒性因素、自身免疫性疾病、长期大量饮