端粒酶检测的定量PCR相关技术及应用研究

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该文围绕端粒酶检测进行研究.开展了两项发现,建立了两个端粒酶定量检测系统,并对不同阶段的白血病病例进行了端粒酶检测研究.分述如下:1.RNA循环逆转录反应方法(该发明已申请国家发明专利)RRTR的原理是通过控制高温变性-低温退火延伸的循环过程,利用FD-TRT的催化,反复利用起始的RNA作为模板进行逆转录反应.2.RRTR-CQ-PCR系统非 同源对照模板能够消除困扰竞争定量PCR的异源双链现象.该文设计了非同源对照模板构建 的优选低严谨性PCR扩增方案,分别构建了HCV RNA和hTERTmRNA的竞争对照模板.3.端粒酶 介导单一片段扩增方法(该发明大申请国家发明专利)TSFA的原理是利用端粒酶活性介导特PCR扩增预定DNA,产物为一条较长的特定DNA片段,反映端粒酶活性.4.白血病病例的端粒 检测应用TSFA-CQ-PCR和RRTR-CQ-PCR系统,对正常人骨髓细胞进行了端粒酶活性和hTERTmRNA定量检测.
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