特殊形态与功能的色谱固定相的制备研究

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纳米材料具有特殊的物理化学、电学等特性,在色谱分离介质的制备方面的应用已经凸显出强大的优势。为满足蛋白质组学、手性药物等复杂或特殊样品分离分析需要的表面特殊功能化固定相制备也是近期分析化学、材料科学的研究热点。   采用不同形态的纳米材料制备具有特殊形态与功能的纳米色谱固定相。利用棒状纳米材料的特殊结构特点,在装填过程中形成一定架构,有效减小反压,成功制备了纳米SBA-15填充CEC柱。综合整体固定相制备简单和纳米材料高比表面积的优点,将不同形态的纳米材料分别掺杂在整体固定相床层中,制备了纳米材料掺杂杂化整体固定相。纳米材料巨大的比表面积可显著提高杂化整体柱的分离柱效,最高可达290,000塔板数/米。纳米材料表面的氨基基团提供了离子交换色谱的分离机理,同时整体材料表面的-C4基团可提供反相色谱的分离机理,因此所制备的杂化整体柱具有反相-离子交换混合分离模式的特征,对中药组分、多肽等样品具有更好的分离能力。   将大环糖肽类药物用于色谱固定相的表面改性,制备了多种大环抗生素手性色谱固定相(CSP)。大环抗生素的键合既可以通过其结构中的氨基与固定相表面的环氧基直接反应,也可利用戊二醛作为间隔臂通过间接的方法进行固定相表面改性。制备的大环抗生素CSP均具有良好的手性拆分能力。将新型糖肽类抗生素伊瑞霉素通过直接法一步键合在CEC整体柱上,成功拆分了5种手性氨基酸和手性药物罗格列酮,该固定相在很宽的缓冲液pH范围内对含苯环的手性氨基酸具有很强的手性拆分能力。也将万古霉素通过间接法键合在硅胶固定相表面,在液相色谱模式下成功拆分了5种手性化合物对映体。系统考察了流动相条件对映体拆分的影响,证实有机改性剂,缓冲液种类、pH和浓度以及温度对保留和手性选择性均有明显的影响。   为了发展具有高选择性蛋白质识别能力的色谱固定相,使用分子印迹技术(MIT)制备了蛋白质分子印迹材料。首先制备了以金属螯合作用固定蛋白质的表面印迹硅球,所发展的方法克服了蛋白质印迹聚合物传质慢的缺点,可在30min内达到吸附平衡。基于蛋白质复杂的结构特点,提出了“漂浮”印迹的概念,将部分蛋白质保留在印迹硅球表面,以提供一种弹性的识别位点,与印迹位点对目标蛋白质共同作用,实现了立体印迹的功效。与传统的表面印迹材料相比,所制备的立体漂浮蛋白质印迹硅球对目标化合物具有更强的选择性识别能力。最后,对蛋白质印迹光子晶体传感器(MICA)的制备技术进行了探索性的研究。
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