趋化因子VCC-1在肝细胞癌中的表达及意义

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目的:VCC-1是一种新发现的趋化因子,目前研究表明VCC-1与肿瘤发生发展有关,且与血管生成密切相关。而在肝细胞癌中研究较少,本研究拟研究趋化因子VCC-1在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法:设计VCC-1 PCR所需引物,根据验证结果采用最佳引物,制作VCC-1及内参GAPDH标准品,确定二者的标准曲线各参数。首先收集组织标本,培养肝细胞癌细胞株。再提取8种肝细胞癌细胞株、10例正常肝脏组织标本、42例肝癌组织及癌旁组织中的总RNA表达情况,采用RT-PCR法逆转录成cDNA。最后采用RealtimePCR法分别检测以上样本的mRNA表达,利用2- Ct公式计算出不同样本VCC-1基因mRNA的表达,了解各细胞株之间表达差异,正常肝脏组织有无表达,以及癌组织与癌旁组织表达有无差异,并结合临床资料分析VCC-1表达与临床各种指标之间关系,分析其临床意义。结果:在8种肝细胞癌细胞株中,SUN398的VCC-1 mRNA相对表达量最高,而Hep3B和Huh7几乎不表达,其他细胞株SUN387、SUN449、SUN423、HepG2、PLC5表达介于之间。10例正常肝组织中,8例无表达,其中2例微表达,较细胞株及癌组织、癌旁组织表达要低(P<0.01)。42例标本中,均有乙肝病毒感染,癌组织及癌旁组织同时存在表达,癌组织高于癌旁组织26例(61%,14.9±7.6倍),癌旁高于癌组织16例(39%,6.9±5.4倍),癌组织表达上调(P<0.01)。结合临床资料发现癌组织高表达VCC-1与肿瘤分化程度、直径有关(P<0.05),而与性别、年龄、AFP、癌栓无关(P>0.05),而复发的3例标本均有癌组织高表达(20.1±2.3倍),提示VCC-1高表达可能与肝细胞癌高危复发相关。有癌栓的8例标本中,有5例出现癌组织VCC-1高表达(17.3±4.5倍),3例低表达。结论:在肝癌细胞株中的VCC-1表达存在差异,为下一步研究VCC-1基因在肝细胞癌中的作用地位奠定了基础。正常肝组织基本无表达,基本符合国外研究结果。结合肝细胞癌组织样本,说明VCC-1可能与病毒导致的慢性炎症相关。癌组织表达上调,说明VCC-1表达升高可能与肝细胞癌发生发展有关,并有可能成为肝细胞癌的治疗靶点。
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