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恶性神经胶质瘤是发病率和死亡率最高的中枢神经系统肿瘤。许多细胞因子,例如缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-lα, HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)在恶性神经胶质瘤的发生和发展过程中起着重要的作用。和厚朴酚(honokiol)是从中药厚朴中提取的一种联苯酚类化合物,已被众多实验证明具有抗炎、抗血管生成、抗肿瘤和抗氧化的药理作用。和厚朴酚可抑制多种恶性肿瘤细胞的生长及迁移,但其对神经胶质瘤细胞的作用还未有报道。我们以人的恶性神经胶质瘤细胞U87细胞系为研究对象,观察和厚朴酚对其生长的影响及产生作用的分子机制。实验结果表明,和厚朴酚能够显著地抑制U87细胞的生长。在分子水平上,和厚朴酚降低了HIF-1α的蛋白表达量,但是对其mRNA表达没有明显影响。泛素化实验显示,和厚朴酚能够增加HIF-1α的泛素化,从而促进HIF-1α的降解。同时,和厚朴酚也能抑制HIF-1α下游基因在mRNA水平的表达,如VEGF和葡萄糖转运体1(glucosetransporter1, GLUT1)。通过这些实验数据,我们得出如下结论：和厚朴酚能够抑制U87神经胶质瘤细胞生长,此作用可能与其促进HIF-1α的泛素化,降低HIF-1α及其下游基因VEGF和GLUT1的表达有关。我们下一步的实验计划是在神经胶质瘤的动物模型上进一步研究和厚朴酚的抗肿瘤作用及机制,为其临床应用提供参考依据。结论：和厚朴酚能抑制U87神经胶质瘤细胞的生长,此作用可能与其增加HIF-1α的泛素化,促进HIF-1α降解并抑制下游基因VEGF和GLUT1的表达有关。胰高血糖素样肽-1(glucagon like peptide-1, GLP-1)是由肠道内分泌L细胞分泌的一种肠促胰岛素。GLP-1与受体(GLP-1receptor, GLP-1R)结合后,可产生拟胰岛素样作用,并能改善胰岛β细胞功能,促进胰岛素分泌,对其他器官和组织的脂代谢也有广泛的影响。GLP-1及其长效类似物已被应用于临床治疗2型糖尿病(type2diabetes mellitus,T2DM),在控制血糖同时还可调节伴发的脂代谢紊乱。但是,由于GLP-1R分布广泛,GLP-1作用于不同部位受体所产生的效应不尽一致；在不同种属的动物体内产生的效应也不同。以脂代谢为例,GLP-1对脂类的合成代谢及分解代谢均有一定的调节作用,但其综合效应在不同的实验对象中都有差异。本研究采用人GLP-1(7-36)作为实验药物,在胰岛素主要靶细胞之一的小鼠3T3-L1脂肪细胞中,模拟T2DM患者体内高糖高胰岛素的胰岛素抵抗(insulin resistant, IR)病理状态,采用高糖(25mM)高胰岛素(100nM)作用24h诱导胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞模型,运用ELISA、Western Blot、油红O染色等方法观察GLP-1对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞脂肪酸代谢的影响及机制。ELISA结果显示,GLP-1对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞中游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)的含量影响与胰岛素有关：在有胰岛素(100nM)存在时,GLP-1可增加上清液中FFA含量；而无胰岛素存在时,GLP-1可减少上清液中FFA含量。类似地,GLP-1在有胰岛素存在时,可升高胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase, FAS)的蛋白表达量,而无胰岛素时则无此作用。油红O染色显示GLP-1对细胞内甘油三酯的储存量没有影响。随后,我们又研究了GLP-1产生这些作用的分子机制。Western Blot结果显示在有胰岛素存在时,GLP-1可促进蛋白激酶B (protein kinase B, PKB)磷酸化；而无胰岛素时则无此作用。PKB磷酸化的抑制剂LY294002、wortmannin可阻断有胰岛素存在时GLP-1对PKB磷酸化的促进作用及对上清液FFA含量的升高作用。另外,在有／无胰岛素存在时,GLP-1均可降低激素敏感性脂肪酶(hormone sensitive lipase, HSL)的蛋白含量。以上研究表明,GLP-1可增强胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞对胰岛素的敏感性,使胰岛素产生促进PKB磷酸化并上调FAS表达的作用,从而升高上清液中FFA的含量。而无胰岛素时,GLP-1自身可降低HSL表达,抑制甘油三酯分解,从而降低上清液中FFA含量。因此,GLP-1对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞脂代谢的调节作用取决于细胞所处的生理病理状态,其显示出的最终效应是脂类合成代谢与分解代谢综合调节的的结果。结论：1.胰岛素浓度可影响GLP-1对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞脂肪酸代谢的调节作用。2.GLP-1可增强胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞对胰岛素的敏感性。3.GLP-1可降低胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞中HSL的含量。