内源酶在刺参肠自溶中的作用及寡肽抗氧化活性研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:mirror722
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在我国,加工海参过程中,海参肠通常作为废弃物被丢弃,不仅造成营养损失,而且也会引起环境污染。海参具有极强的自溶能力,这给海参的加工、贮藏和运输带来了极大的不便。本文以刺参肠为研究对象,采用SDS-PAGE方法检测,通过添加蛋白酶抑制剂研究刺参肠内源酶对其自溶的作用。SDS-PAGE的结果说明TLCK、E-64、Antipain抑制刺参肠的自溶作用最显著,TPCK和胃蛋白酶抑制剂对刺参肠的自溶有部分抑制作用。这表明丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶对刺参肠自溶起主要作用,而胃蛋白酶对刺参肠自溶起微弱的作用。在前期工作基础上,研究了两种刺参肠自溶寡肽Val-Gly-Thr-Val-Glu-Met、 Val-Thr-Pro-Tyr的抗氧化活性。应用电子自旋共振的方法(ESR),检测刺参肠自溶寡肽对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除情况。两种刺参肠自溶寡肽对-OH、O2-·和DPPH自由基均有很强的清除能力,且呈明显的量效关系。对于不同自由基,Val-Gly-Thr-Val-Glu-Met在相应的浓度下清除能力均显著高于Val-Thr-Pro-Tyr(p<0.05)。进一步,利用细胞培养体系,采用人白血病细胞Jurkat、HL-60,考察刺参肠自溶寡肽对H2O2诱导的细胞氧化损伤的影响。细胞相对生存率的结果表明,随着H2O2浓度升高,细胞相对生存率下降。DNA凋亡条带结果表明,刺参肠自溶寡肽在低浓度下,未能对H2O2诱导的Jurkat细胞DNA氧化损伤起到保护作用。在高浓度下与H2O2协同诱导细胞死亡,其作用机理还有待于进一步研究。
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