六株玫烟色拟青霉的适温性、多菌灵抗性及对叶螨的杀卵活性评价

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玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)是一种能感染多种类型害虫的昆虫病原真菌,在害虫尤其是刺吸式口器害虫的微生物防治中的应用潜力很大。为了筛选获得针对叶螨的生防潜力菌株,本研究在15~35℃范围内综合比较研究了六株野生型玫烟色拟青霉的菌落生长、产孢量及所产孢子的活力,评价了各菌株对常用杀菌剂多菌灵的抗性,从中选出适温范围广、较耐多菌灵的菌株对朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)进行了杀卵活性的生物测定,最终获得了一株兼具多个优良性状的杀螨卵菌株。主要结果摘要如下。 适温性 将六株玫烟色拟青霉分别用SDAY平板在15、20、25、30和35℃下进行培养,逐日测定菌落直径,在菌落充分产孢时取样计算单位面积产孢量,而后采用营养液萌发率法测定各温度下所产孢子的活孢率。结果表明,玫烟色拟青霉适温性的种内变异较大,各温度下不同菌株的生长速率、产孢量及活孢率之间均存在显著差异,但最适温都是25℃,适温区为20~30℃。低温15℃下Pfr2175的菌落生长最好但产孢最差,其他菌株的菌落生长和产孢都受到不同程度影响。Pfr4205、Pfr116、Pfr6206和Pfr2175在20~30℃内的菌落生长和产孢都较好。在25℃下,Pfr4205、Pfr116和Pfr6206第9天的菌落直径都在33mm以上,产孢量都达到10~7个孢子/mm~2以上。菌株Pfr6206和Pfr2175在35℃下仍有较高的产孢量和活孢率,显然是较能适应夏季高温的菌株。总体看,15℃低温对六株玫烟色拟青霉生长、产孢及孢子活力的影响大于35℃高温的影响,偏离25℃最适温,生长和产孢都或多或少下降。 对多菌灵的抗性 在含梯度浓度多菌灵的SDAY平板上分别测定了六株玫烟色拟青霉的菌落生长(多菌灵0~16μg/mL SDAY)和单孢菌落形成数(多菌灵0~256μg/mL SDAY)。结果表明,各菌株对多菌灵的敏感性差异显著。Pfr6206的菌落生长在六个菌株中受影响最小,在1.0μg/mL多菌灵浓度下菌落直径达到19.2mm,抑制率为41.0%;而Pfr116对多菌灵非常敏感,相同浓度下菌落直径只有8.2mm,抑制率达90.2%,其余菌株介于其间。在不同浓度多菌灵胁迫下六株玫烟色拟青霉的单孢菌落形成数观察值很好地拟合了逻辑斯蒂方程(r~2≥0.90),由此估计出各菌株的最低抑菌浓度MIC(单位:μg/mL):菌株Pfr4205和Pfr116的MIC<20,表现为低抗性,其余四菌株均表现为中度抗性(20≤MIC≤100),而Pfr6206的MIC值高达93.5,很接近MIC>100的高抗标准,
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